研究目的: 一.检测flavopiridol和泰素两种药物在体外对SKOV3细胞存活率及凋亡情况的影响，判断两种药物有无协同作用，若有协同作用，探讨其发生的可能机制； 二.建立卵巢癌腹腔移植瘤和皮下移植瘤模型，研究flavopiridol和泰素对肿瘤的体内治疗作用，判断两种药物体内实验有无协同作用。 材料和方法: 一.CCK8法测定flavopiridol和泰素单独应用及联合应用对SKOV3细胞的存活率影响； 二.流式细胞术及TUNEL法检测细胞在不同药物处理组细胞凋亡情况的改变，用比色法测定各组caspase-3活性改变，并测定SKOV3细胞在泰素作用24小时后不同时间caspase-3活性变化； 三.RT-PCR分析药物不同处理组细胞周期素D1表达情况的改变。 四.以SKOV3细胞株在5-6周龄BALB/c裸鼠建立卵巢癌腹腔移植瘤和皮下移植瘤模型，通过肿瘤大小观察，抑瘤率计算，TUNEL检测及免疫组化法测定微血管密度来判断flavopiridol和泰素单独治疗和联合应用的疗效。 实验结果: 一.细胞存活率测定 300nMflavopiridol和1μM泰素单独治疗24小时均可引起SKOV3细胞增殖受抑制。泰素作用24小时后给予flavopiridol治疗24小时的联合治疗方案可以对细胞增殖抑制产生明显的协同作用(P＜0.001)。 二.SKOV3细胞凋亡情况检测 细胞分为300nMflavopiridol24小时(F24)，1μM泰素24小时(T24)，1μM泰素24小时后无药培养基培养24小时(T24+ND24)，1μM泰素24小时后300nMflavopiridol处理24小时(T24+F24)以及无药培养基处理24小时(ND24)这五种处理。流式细胞仪检测提示两药均可导致细胞凋亡率升高，T24+ND24组凋亡率高于T24组，T24+F24处理组较F24和T24+ND24处理组的凋亡率高，两药存在协同效应。TUNEL检测支持以上结果。联合用药在激活caspase-3活性方面也具有协同作用。 泰素作用24小时后，随着SKOV3细胞在不含药物培养基内培养时间延长(0-360分钟)，caspase-3活性不断增高。 三.flavopiridol和泰素对细胞周期素D1表达的影响 flavopiridol可以下调SKOV3细胞的细胞周期素D1表达，泰素对其表达无影响，两药合用对下调细胞周期素D1表达有协同作用。 四.flavopiridol和泰素体内实验疗效 腹腔移植瘤模型因小鼠死亡率过高未作统计分析。 Flavopiridol和泰素两种药物单独治疗，对小鼠皮下移植瘤模型有良好的抑瘤效果(抑瘤率分别为84.5％和85.7％)，泰素后7小时或24小时给予flavopiridol的联合治疗组抑瘤作用稍差(分别为60.6％和68.9％)。TUNEL染色证实，单药治疗组肿瘤组织凋亡比例更大，联合治疗组也存在部分凋亡，无治疗组组织几乎无凋亡。MVD测定单药治疗组MVD明显降低，联合治疗组MVD较对照组也有明显降低，但较单药治疗高。 结论: 1.Flavopiridol和泰素两种药物单独治疗对体外杀伤SKV03细胞，诱导细胞凋亡均有明确疗效，先泰素后flavopiridol的联合治疗方案较这两种药物单独使用可以达到协同效应。 2.Flavopiridol和泰素的体外协同作用可能产生于它们对caspase-3活性激活和细胞周期素D1下调的协同作用。 3.瘤体内给药方式下，flavopiridol对卵巢癌皮下移植瘤模型单药治疗效果与泰素相当，并能诱导细胞凋亡和降低肿瘤MVD。 4.泰素后7小时或24小时给予flavopiridol瘤体内注射并未观察到体外实验观察到的协同效应。今后研究中需对给药时间间隔和给药方式进一步探讨。