【摘 要】
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端粒酶是一种特殊的逆转录酶,能在人类染色体末端添加（TTAGGG）重复序列来延长端粒长度.人类端粒酶催化亚单位（hTERT）是端粒酶活性的限速因子.正常人二倍体成纤维细胞中hTERT的表
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端粒酶是一种特殊的逆转录酶,能在人类染色体末端添加（TTAGGG）<,n>重复序列来延长端粒长度.人类端粒酶催化亚单位（hTERT）是端粒酶活性的限速因子.正常人二倍体成纤维细胞中hTERT的表达可以重建端粒酶活性,并通过端粒的延伸而延长细胞的复制寿命.为了研究hTERT对端粒酶的调控机理,我们采用两种方法重建二倍体细胞的端粒酶活性：1、通过带绿色荧光蛋白的hTERT重组质粒（PEGFP-hTERT）转染WI-38人胚肺成纤维细胞重建端粒酶活性.2、经PBabe-hTERT逆转录病毒载体包装、感染重建端粒酶活性.分析转染/感染细胞的端粒酶活性、端粒长度及其生物学行为的变化.此外,经过计算机分析,我们在hTERT基因启动子区域发现了雌激素反应元件,构建了带绿色荧光蛋白的两种不同长度的hTERT启动子重组质粒PERE+PERE-,前者含雌激素反应元件,后者不含雌激素反应元件.把PRER+和PERE-分别转染MCF-7乳腺癌细胞和WI-38细胞.以期探讨雌激素对hTERT基因启动子转录活性的影响.结论:hTERT在细胞衰老和肿瘤的发生中起重要作用,hTERT是端粒酶活性的限速因子.在正常人体成纤维细胞hTERT的表达可重建端粒酶的活性和延长细胞端粒长度.hTERT基因是雌激素作用的靶基因,雌激素通过激活雌激素受体,与hTERT基因的雌激素反应元件结合而对hTERT基因的转录起调控作用.
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