武汉市饮用水有机提取物富集技术及其遗传毒性研究

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改革开放以来,在经济和工业发展的同时,与人们生活以及健康密切相关的饮用水日益遭到污染,其中饮用水中有机物污染对人群健康构成了潜在威胁。目前国内外大量流行病学调查和毒理学研究表明经氯化消毒处理的末梢水中的有机污染物具有遗传毒性。由于饮用水中有机物种类繁多,含量较低,因此,在进行水体有机物检测和毒理学研究之前,必须要对饮用水中有机物进行富集浓缩,大孔树脂是一种常用富集材料。目前大部分研究只是用单一树脂富集水中有机污染物。由于不同树脂的吸附性能差别很大,吸附的有机物种类不同,单一树脂选择性吸附水中有机物,不能完全代表水中有机物的毒性。其次,在以往的研究中,比较不同水源及不同水文期末梢水中有机污染物毒性差异时,很少考虑树脂的富集效率,致使各组间的毒理学评价缺乏可比性。本课题旨在用XAD系列不同极性树脂(XAD-2、XAD-8及两者等体积混合的复合树脂XAD-2/8)富集汉江和长江水源末梢水中有机物,GC/MS检测树脂富集的有机物种类,再用富集的有机物染毒于HepG2细胞,比较其细胞毒性和遗传毒性。用GC/MS和毒理学数据综合评价这三种树脂的富集性能;通过复合树脂性能研究表明,复合树脂富集水中有机物,无论是富集水中有机物种类,还是毒理学指标,较单一树脂而言,更能全面、准确地反映水中卫生状况。采用复合树脂富集武汉市末梢水中有机物,以人肝肿瘤细胞HepG2作为靶细胞,通过彗星试验研究汉江和长江水源末梢水不同水文期有机提取物对人类肝肿瘤细胞遗传毒性作用。其次,以GC/MS为有机物鉴定手段,确定以武汉长江和汉江为水源末梢水中有机物的污染谱系,并以末梢水中有机物在丰水期和枯水期中出现的频度及有机物的毒性为指标,参照国内外有关优先控制物的筛选方法,确定优先控制污染物的种类,以便为汉江和长江水体污染监测与治理,以及其饮用水有机物污染危险性评价和卫生标准制定提供科学资料和依据。第一部分复合大孔树脂对饮用水中有机物的富集技术研究选用XAD-2、XAD-8和XAD-2/8复合树脂,对武汉汉江水源和长江水源的末梢水中的痕量有机物进行等比富集。利用GC/MS对有机物进行定性分析,比较其富集有机物的种类差别。利用MTT实验和彗星实验检测三种树脂富集的有机污染物在细胞毒性和遗传毒性的差异。GC/MS结果显示:极性树脂XAD-8富集有机物的种类(汉江72种;长江50种)多于非极性树脂XAD-2(汉江43种;长江39种),而复合树脂富集的有机物种类(汉江110种;长江79种)几乎包括前两者。MTT实验显示:在10、30、50、100ml/ml剂量下,XAD-8富集的有机物的细胞毒性明显大于XAD-2(P<0.05)。以汉江为水源的末梢水在高剂量(100ml/ml)和以长江为水源的末梢水在10、30、50、100ml/ml剂量下,XAD-2富集的有机物的细胞毒性明显低于XAD-2/8(P<0.05)。以汉江为水源的末梢水在30、50、100ml/ml剂量下和以长江为水源的末梢水在50、100ml/ml剂量下,XAD-8富集的有机物的细胞毒性明显大于XAD-2/8(P<0.05)。彗星实验显示:XAD-2富集的有机物的遗传毒性明显低于XAD-8(P<0.05)。以汉江为水源的末梢水在1、10、30ml/ml剂量下和以长江为水源的末梢水在1、30ml/ml剂量下,XAD-2富集的有机物的遗传毒性明显小于XAD-2/8(P<0.05)。以汉江为水源的末梢水在10、30ml/ml剂量下和以长江为水源的末梢水在10、30ml/ml剂量下,XAD-8富集的有机物的遗传毒性明显强于XAD-2/8(P<0.05)。可见单一树脂富集水中有机物种类不全,并且单一树脂富集的有机物和复合树脂富集的有机物在毒理学上存在差别,复合树脂具有富集有机物种类齐全,更能准确代表水中有机物毒理学的实际情况。所以复合树脂富集水中有机物评价水体卫生状况更准确。第二部分武汉市饮用水有机提取物对HepG2细胞DNA损伤作用研究于丰水期和枯水期采集武汉市汉江和长江为水源的末梢水水样,用XAD-2/8复合树脂等比富集末梢水中有机污染物,以人肝肿瘤细胞HepG2作为靶细胞,应用单细胞凝胶电泳技术研究有机提取物的遗传毒性作用。研究发现,饮用水有机提取物处理HepG2细胞24小时后,随着剂量增加,HepG2细胞Olive尾矩值逐渐增大,并呈明显的剂量-依赖关系,各有机物处理组致DNA损伤程度显著大于溶剂对照组(P<0.05)。同一水文期不同水源比较,在剂量10ml/ml和30ml/ml下,汉江水源末梢水有机提取物致DNA损伤程度大于长江水源(P<0.05);同一水源不同水文期时比较,在剂量10ml/ml和30ml/ml下,枯水期有机提取物致DNA损伤程度大于丰水期(P<0.05)。第三部分武汉市汉江和长江水源饮用水中有机物污染谱系分析于丰水期和枯水期采集武汉市汉江和长江为水源的末梢水水样,用XAD-2/8复合树脂富集末梢水中有机污染物,用GC/MS方法分析各样品的有机物组成,在本实验条件下,以汉江为水源的末梢水,在丰水期和枯水期分别检测出有机物110种和102种。以长江为水源的末梢水,在丰水期和枯水期分别检测出有机物79种和95种。污染物中以烷烃、烯烃、卤代烃、酯类、邻苯二甲酸酯类为主。汉江水源末梢水有机物种类无论是在枯水期还是丰水期明显多于长江水源的末梢水。此次实验表明以汉江和长江水源的末梢水受到一定程度的有机物污染,污染物种类复杂且来源广泛,应该引起人们的高度重视。
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