【摘 要】
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目的:采用高脂饮食联合尾静脉注射链脲佐菌素方法复制2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型,观察天行健参味颗粒对模型大鼠糖脂代谢、氧化应激损伤、炎症因子以及肝脏IRS/PI3K/AKT信号通路的影响,探讨天行健参味颗粒改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制。方法:通过高脂饲料喂养4周联合尾静脉注射STZ（35mg/Kg）方法建立2型糖尿病SD大鼠IR模型。将造模成功的50只大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、天
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目的:采用高脂饮食联合尾静脉注射链脲佐菌素方法复制2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型,观察天行健参味颗粒对模型大鼠糖脂代谢、氧化应激损伤、炎症因子以及肝脏IRS/PI3K/AKT信号通路的影响,探讨天行健参味颗粒改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制。方法:通过高脂饲料喂养4周联合尾静脉注射STZ（35mg/Kg）方法建立2型糖尿病SD大鼠IR模型。将造模成功的50只大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、天行健参味颗粒高、中、低剂量组,每组10只;另选取10只同周龄正常SD大鼠作为空白组。对各组大鼠分别给予相应的水及药物干预4周。观察各组大鼠干预前后每周体质量变化、使用血糖仪检测各组大鼠干预前后FBG水平变化。在对各组大鼠干预4周后,进行OGTT试验,并计算葡萄糖耐量曲线下面积AUC。干预4周后取材,剥离腹主动脉,负压真空采血管进行取血,检测大鼠血清Fins水平并评估胰岛素抵抗指数HOMA-IR;检测大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量;检测大鼠血清氧化应激指标SOD、MDA、GSH-Px水平;检测大鼠血清炎症因子IL-6、TNF-α水平以及脂联素水平;检测大鼠肝功和肾功AST、ALT、Scr、BUN水平;行肝脏组织HE染色观察大鼠肝脏病理变化。为进一步明确天行健参味颗粒改善T2DM肝脏IR作用机制,采用蛋白免疫印迹法检测肝组织IRS-1、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平,采用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肝脏组织内IRS-1、PI3K、AKTm RNA表达。结果:1.与空白组相比,模型组大鼠FBG显著升高,OGTT试验出现异常,模型组在0min的血糖明显增高,血糖峰值延后,且到120min血糖未有明显回落,各时间点血糖及AUC明显升高,表明模型组大鼠出现明显的糖耐量降低,而天行健参味颗粒可降低FBG水平,降低OGTT试验各时间点血糖及AUC;与空白组相比,模型组大鼠Fins、HOMA-IR、TC、TG均升高,而天行健参味颗粒可降低Fins、HOMA-IR、TC、TG水平。其中天行健参味颗粒高剂量效果最佳。2.与空白组相比,模型组大鼠SOD、GSH-Px含量显著降低、MDA含量显著升高,表明模型组存在氧化应激损伤,而天行健参味颗粒可提高SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量,表明天行健参味颗粒在改善氧化应激损伤方面具有重要作用;与空白组相比,模型组大鼠IL-6与TNF-α水平显著增高,表明模型组大鼠体内出现炎症反应,而天行健参味颗粒可降低大鼠IL-6与TNF-α水平,表明天行健参味颗粒能够降低2型糖尿病大鼠的炎症反应。在改善氧化应激和炎症因子方面天行健参味颗粒高剂量效果最佳。3.与空白组相比,模型组大鼠的AST、ALT、Scr、BUN均显著升高,模型组肝细胞板排列不规整,胞质染色不均匀,可见胞质融合肿胀,胞核固缩,沿血管周边肝细胞呈现中度的脂肪样变性,可见有少量炎性细胞浸润。天行健参味颗粒可降低大鼠AST、ALT、Scr、BUN水平,对肝组织病理损伤有不同程度的改善,其中天行健参味颗粒高剂量效果最佳。4.Western-blot和Real time-PCR检测:与空白组相比,模型组大鼠IRS-1、p-PI3k、PI3K、p-AKT、AKT蛋白的相对表达量均降低。天行健参味颗粒可提高大鼠IRS-1、p-PI3K、p-AKT、AKT的蛋白表达水平。与空白组相比,模型组大鼠IRS-1、PI3K、AKTm RNA水平显著降低,天行健参味颗粒可提高大鼠IRS-1、PI3K、AKTm RNA水平。结论:1.天行健参味颗粒高剂量能改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱,改善糖耐量,增加胰岛素的敏感性。2.天行健参味颗粒高剂量能改善2型糖尿病大鼠的氧化应激损伤和炎症反应。3.天行健参味颗粒对2型糖尿病大鼠肝肾功能具有保护作用,并能减轻肝脏病理损伤。4.天行健参味颗粒调节IRS/PI3K/AKT信号通路,可能是其改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗的机制之一。
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