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本论文主要探索了牛第二次减数分裂中期(MII期)卵母细胞和生发泡期(GV期)卵母细胞的玻璃化冷冻保存方法,研究结果如下:分别用玻璃微细管(GMP)法和固体表面玻璃化(SSV)法冷冻保存牛MII期卵母细胞,结果表明,SSV法(32.6%)略优于GMP法(27.1%),但经统计分析显示,GMP法(27.1%)与SSV法(32.6%)的卵裂率差异不显著(P＞0.05),两种冷冻方法与未经冷冻保存的对照组(57.9%)存在极显著差异(P＜0.01)。分别用体外受精和孤雌激活法对牛MII期卵母细胞和冷冻解冻后的卵母细胞进行体外培养,结果表明,SSV+孤雌激活组(2.7%)略优于SSV+体外受精组(0.6%),但经统计分析显示,SSV+体外受精组(0.6%)和SSV+孤雌激活组(2.7%)对冷冻后卵母细胞发育为囊胚的比率差异不显著(P＞0.05),但冷冻组与未经冷冻保存的对照组显著极差异(0.6%,2.7%和23.2%,22.7%,P＜0.01)。不同浓度细胞松弛素B(CB)预处理对牛体外成熟卵母细胞玻璃化冷冻后发育能力的影响,结果表明:存活率上,各浓度CB处理组与对照组没有显著差异(P＞0.05);激活后卵裂率上,20μg/ml CB处理组显著高于对照组(47.67%和30.25%,P＜0.05);囊胚率上,20μg/ml CB处理组极显著高于对照组(9.00%和1.75%,p≤0.01),同时还显著高于其它4个处理组(P＜0.05)。说明CB在玻璃化冷冻过程中的保护作用存在一定浓度的依赖性,其中用浓度20μg/ml CB处理最适于牛成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果的改善。不同浓度细胞松弛素B预处理牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻的影响,结果表明:玻璃化冷冻后,CB处理组和未处理组之间卵母细胞成熟率差异不显著(P＞0.05),但均显著低于体外培养组。说明试验中所用浓度CB(2.5、7.5、15、20和30μg/ml)对牛GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的改善作用不明显。