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目的:观察钙离子,镁离子对非选择性阳离子通道(TRPA1)以及单点突变对通道(L906C)整流的影响,进一步探讨TRPA1整流的分子机制。为TRPA1的深入研究作进一步探讨。方法:通过单点突变将L906亮氨酸突变为半光氨酸,经PCR扩增,测序正确的产物转染到大肠杆菌中表达,然后提取通道质粒。将单点突变后的通道质粒与携带绿色荧光蛋白的质粒按照9:1共转到HEK293细胞中表达24-36小时后,再进行电生理检测,实验过程中采用AITC使通道激活。通过替换细胞内外的二价阳离子(钙离子和镁离子)观察