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目的:构建新西兰大耳兔膝关节软骨损伤模型,通过观察不同干预情况下兔膝关节软骨损伤的修复水平,探索Runx2基因转染骨髓间充质干细胞是否可以促进膝关节软骨损伤的修复,以期为广大膝关节软骨损伤患者提供更有效的临床治疗方案。方法:新西兰大耳兔20只,雄性,体重约2.5~2.7kg。适应性喂养一周后进行膝关节软骨损伤造模手术,造模成功后随机分为4组,每组5只,分别为A:空白对照组、B:透明质酸钠组、C:单纯骨髓间充质干细胞组、D:Runx2转染骨髓间充质干细胞组,分别于第4、8周进行膝关节取材,取材后对各组标本进行软骨组织修复肉眼观察;通过RT-PCR实验检测各组损伤部位修复物中Ⅱ型胶原(ColII)、蛋白聚糖(Agg)、Ⅹ型胶原(Col-x)、Ⅰ型胶原(Col-I)及Runx2的m RNA表达量;通过Western Blot实验分别检测各组的II型胶原蛋白表达量;对各组标本软骨切片分别进行HE染色、Masson染色,分析各组修复物性质和修复机制。结果:1、膝关节软骨损伤造模成功后,各实验组软骨缺损部分都得到不同程度的修复,通过组织学肉眼观察发现,干预4周后,与空白对照组相比,透明质酸钠组损伤部位修复效果最好;干预8周后,与空白对照组相比,Runx2转染骨髓间充质干细胞组修复效果最好;2、通过RT-PCR实验检测结果显示:干预4周后,各实验组蛋白mRNA表达量均显著高于空白对照组(P<0.01),其中透明质酸钠组mRNA表达量显著高于其余实验组(P<001);干预8周后,各实验组蛋白mRNA表达量均显著高于空白对照组(P<0.01),Runx2转染组除了I型胶原显著低于透明质酸钠组外(P<0.05),其余蛋白mRNA表达量显著高于透明质酸钠组(P<0.01)3、通过Western Blot实验结果显示:干预4周后,各实验组II型胶原蛋白表达量均显著高于空白对照组(P<0.01),其中透明质酸钠组的II型胶原蛋白表达量显著高于其余各实验组(P<0.05),在第8周时,各实验组II型胶原蛋白表达量均显著高于空白对照组(P<0.01),其中Runx2组的II型胶原蛋白表达量显著高于其余各实验组(P<0.01);4、通过HE染色、Masson染色结果观察发现,各实验组软骨缺损部分均得到不同程度的恢复,其中透明质酸钠组在第4周软骨修复最好,缺损处基本被修复物填充完整;在第8周时,Runx2组软骨缺损部分修复最好,缺损处不仅被白色修复组织填充完整,而且与周围正常软骨融合,交界模糊。结论:1、关节软骨损伤后,很难通过自愈的方式进行修复,而关节腔注射Runx2基因转染骨髓间充质干细胞对软骨损伤的修复有一定的促进作用。2、注射单纯骨髓间充质干细胞在一定程度上能促进软骨损伤的修复,而转染Runx2基因的骨髓间充质干细胞修复效果更优,表明Runx2基因在某种程度上可以调控骨髓间充质干细胞增殖分化从而促进损伤修复,但其主要作用机制仍需进一步研究。3、与其余各实验组相比,Runx2转染组在第8周软骨损伤修复效果最好,表明Runx2基因在长期时间内对软骨损伤修复有更好的促进作用。