NDRG1基因在宫颈癌细胞及组织中的表达及意义

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目的观察人类N-myc下游调节基因1(NDRG1)、COX-2及VEGF在宫颈鳞癌组织中的表达及意义;建立稳定转染含NDRG1的宫颈癌SiHa细胞株,探讨NDRG1对SiHa细胞增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制,为宫颈鳞癌的诊治和判断预后提供依据。方法应用免疫组织化学方法检测15例正常宫颈组织和80例宫颈癌组织中NDRG1、COX-2及VEGF蛋白的表达情况,并分析其表达与临床病理因素及患者预后的关系;运用Spearman秩相关观察三者蛋白表达的相关性;运用Kaplan-Meier生存曲线分析其表达与患者预后的关系。经脂质体介导将含有NDRG1真核表达质粒转染人宫颈癌SiHa细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆及逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)、Western blot;RT-PCR和Western blot检测阳性细胞克隆COX-2及VEGF表达的改变;噻唑盐(MTT)比色法检测稳定高表达NDRG1的阳性细胞克隆N12的增殖活性;流式细胞仪检测阳性细胞克隆N12的凋亡率。结果(1)80例宫颈鳞癌组织中NDRG1阳性表达率为52.2%,显著低于正常宫颈组织中表达水平(P<0.01);COX-2与VEGF阳性表达率分别为91.2%及77.5%,显著高于正常宫颈组织中表达水平(P<0.01);NDRG1、COX-2及VEGF蛋白的阳性表达与宫颈鳞癌患者的年龄及肿瘤大小无关(P>0.05),而与肿瘤组织病理学分级、FIGO分期及淋巴结转移密切相关(P<0.01)。(2)Kaplan-Meier生存分析显示,宫颈鳞癌组织中NDRG1表达阳性者生存期较长,COX-2及VEGF表达阳性者生存期较短。结论(1)宫颈鳞癌组织中NDRG1表达降低,而COX-2及VEGF表达增加,联合检测宫颈鳞癌组织中NDRG1、COX-2及VEGF的表达可能对判断预后具有重要价值。(2)上调SiHa细胞NDRG1表达后,细胞凋亡增加而细胞增殖降低,其作用机制可能与COX-2、VEGF表达下降有关。
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