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目的：淋巴管畸形(lymphatic malformation)即过去所称的"淋巴管瘤”,系淋巴管系统的先天性发育畸形,除了少数病人在成年发病外,90%的病人在2岁之前即被发现。其虽然是良性的病变,但很少自然消退,而且在创伤、感染或出血时,病变会迅速的增大,可导致面容破损和严重的言语、吞咽以及呼吸困难等。目前临床常用的治疗方法主要有手术治疗、激光治疗、硬化治疗。这些方法均有优点和不足。应根据患者具体病情和医院技术条件,为患者制定个体化的治疗方案,采用综合的序列治疗,以获得最佳疗效。近年来,硬化治疗作为治疗淋巴管畸形的新方法逐渐发展起来。其中平阳霉素(Pingyangmycin,PYM)局部硬化注射治疗淋巴管畸形取得较满意的疗效,且相对于手术及其他治疗方法,硬化治疗有一些优点：比较安全,操作简单；适用于范围广泛,手术不易完全切除的病变；不遗留瘢痕,美观效果好。PYM治疗大囊型病变效果好,对微囊型病变效果欠佳,为增强PYM的效果,药物的联合成为治疗淋巴管畸形的趋势。本课题主要检测人淋巴管畸形内皮细胞(human lymphatic malformation endothelial cells,HLMECs)和组织中是否表达淋巴管内皮特异性标志物透明质酸钠受体(LYVE1),并探讨PYM联合透明质酸钠(sodium hyaluronate,HA)对体外培养的HLMECs的作用效果,为PYM联合HA临床治疗淋巴管畸形提供实验依据。方法：对新鲜婴幼儿淋巴管畸形组织进行HLMECs原代培养。利用淋巴管内皮特异性标志物LYVE1和PROX1染色,鉴定淋巴管畸形组织和HLMECs。将不同浓度(1、10、100、500μg/ml)的PYM和(50、100、300、500μg/ml)HA分别作用于HLMECs12h,24h和48h,观察对HLMECs增殖的影响并筛选其最适有效浓度。然后用该有效浓度的PYM和HA共同作用于HLMECs,0、12、24、48h时,MTT法检测细胞生长情况,24h时,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果：(1)通过淋巴管畸形组织我们获得了HLMECs。(2)淋巴管畸形组织和HLMECs上表达LYVE1和PROX1。(3)在PYM浓度为100μg/ml和500μg/ml时,随时间延长均表现出明显的细胞抑制现象,所以本实验选取PYM的最适浓度为100μg/ml。HA在浓度为300μg/ml时,作用24h时,开始表现出对HLMECs有轻微的抑制作用,所以本实验选取HA的最适浓度为300μg/ml。(4)PYM联合HA共同作用于HLMECs时,在抑制细胞增殖和促进细胞凋亡方面比单纯的PYM作用强。结论：(1)PYM包埋于HA中后可以避免了游离PYM容易被血流冲走的缺点,可在一定时间内维持有效的PYM浓度,延长了PYM作用于淋巴管畸形内皮细胞的时间；(2)采用PYM联合HA的形式给药,可以降低PYM硬化治疗的不良作用,也更加有益于PYM的临床应用；(3)HA可吸附在淋巴管畸形内皮细胞膜上,这不仅使PYM联合HA治疗淋巴管畸形具有靶向作用,而且使淋巴管畸形内皮细胞表面的药物浓度增加,从而可以产生更佳的临床效果。