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原发性肝癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,其中以肝细胞肝癌（HCC）最为常见,约占75-85%。肝细胞肝癌患者早期症状不明显,但其恶性程度较高,转移性强,5年生存率较低。目前主要的治疗手段为以手术为主的综合性治疗,而很大一部分患者由于缺乏更好的早期诊断的生物学标记物,当发现罹患肝细胞肝癌时,已失去手术机会。因此寻找新的生物标记物与治疗靶点,早期诊断,早期治疗,成为了亟待解决的临床需求。环状RNA（circRNA）是近年来新发现的一种非编码RNA,它广泛存在于生物中。不同于一般的线性RNA,环状RNA并没有常见的5’帽和3’腺苷尾结构。与线性RNA相比,环状RNA具有了更强的稳定性。大量的研究表明,环状RNA在不同的组织中具有显著的组织特异性,并且可以作为mRNA的内源性竞争物,结合相应的miRNA发挥生物学作用。这些证据都表明,circRNA在生命过程中具有重要生物学作用。在本研究中,我们发现了一个与HCC相关的circRNA——hsacirc0001306。hsacirc0001306在HCC标本中显著下调。hsacirc—0001306的表达与肿瘤大小关系密切。此外,我们发现hsacirc0001306可能作为miR-527的ceRNA,从而降低其内源性靶标——FBXW7的水平。因此,hsa circ 0001306可能成为HCC的新靶点。第一部分 环状RNA hsacirc0001306在肝细胞肝癌中的表达情况以及发挥作用目的:研究环状RNA hsacirc0001306在肝细胞肝癌中的表达情况以及发挥作用。方法:通过高通量测序法检测8对苏大附一院获得的肝癌组织和对照癌旁组织,寻找其中显著表达差异的circRNA作为研究对象,收集2014年1月至2016年12月期间苏州大学附属第一医院行手术治疗并经病理确诊的50例肝细胞肝癌组织及对照癌旁组织液氮标本,记录患者年龄、性别、临床分期、病理分级等临床资料。实时定量PCR检测肝癌组织和癌旁组织中hsacirc0001306的表达,分析hsacirc0001306与相关临床信息间的相关性。运用特异性的circRNA干扰片段干扰hsacirc0001306后进行增殖、侵袭、周期、凋亡等一系列功能实验。结果:（1）通过高通量测序法在8对肝癌组织和癌旁组织中一共鉴定出40种显著上调的circRNA以及56个显著下调的circRNA（丨log2FC丨>2且p<0.05）（2）其中hsacirc0001306在肝癌组织中显著下调,通过实时定量PCR我们进一步验证了该circRNA的显著下调。（3）此外我们发现hscirc0001306的表达量与肿瘤大小有显著相关性,肝癌直径大于等于5cm组的hsacirc0001306的表达量显著低于肝癌直径小于5cm组。（4）通过构建hsacirc0001306干扰片段以及体内、外实验进一步验证干扰hsacirc0001306可促进肝癌细胞增殖、侵袭,缩短细胞周期以及抑制凋亡作用。结论:（1）环状RNA hsacirc0001306在肝癌组织中表达量显著降低。hsacirc0001306与肝癌肿块大小关系密切。（2）低表达量的hsacirc0001306可促进肝癌细胞增殖、侵袭,缩短细胞周期以及抑制凋亡作用。第二部分 低表达hsacirc0001306促进肝癌进展的相关机制研究目的:研究低表达hsacirc0001306促进肝细胞肝癌进展的可能相关机制。方法:利用生物信息学分析预测hsacirc0001306可能的下游miRNA及mRNA,尝试构建与hsacirc0001306相关的ceRNA网络机制;通过荧光原位杂交技术、双荧光素酶报告基因技术、实时定量PCR验证hsacirc0001306下游miRNA;运用特异性miRNA干扰片段、miRNA类似物进行hsacirc0001306的功能回复实验;最后运用Western blot实验检测下游目的基因的蛋白表达水平。结果:（1）荧光原位杂交技术、双荧光素酶报告基因技术均表明miR-527为hsacirc0001306 的下游 miRNA,干扰 hsacirc0001306 后可显著促进 miR-527 表达;（2）miR-527类似物片段可显著促进肝癌细胞增殖、侵袭能力,缩短肝癌细胞的细胞周期,抑制凋亡;（3）干扰hsacirc0001306或转染miR-527类似物均可减少FBXW7的表达,而干扰miR-527增加FBXW7的表达,功能回复实验进一步验证了 FBXW7与 miR-527、hsacirc0001306 的关系。结论:（1）miR-527 是 hsacirc0001306 的下游靶点之一,hsacirc0001306 通过吸附 miR-527 发挥作用（2）hsacirc0001306 通过hsacirc0001306/miR-527/FBXW7影响肝细胞肝癌进展。