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盐酸金霉素（Chlortetracyline，CTC）是属于碱性广谱抗生素，它是从链霉菌培养液中提取制得的，能有效抑制革兰氏阳性（G+）及阴性（G-）菌、衣原体、支原体等病原菌，对预防控制动物疾病及生长起到关键作用。因其滥用造成的细菌耐药性问题日显突出。因此，建立快速、灵敏的检测盐酸金霉素残留手段，对其监控体系和人类安全意义重大。本实验通过分析盐酸金霉素化学结构和理化性质基础上制备人工抗原；多抗及单抗的制备通过动物免疫及单克隆技术所实现；间接和阻断ELISA筛选高效价、高特异的单抗，制备及鉴定腹水采取体内诱生法及间接和阻断ELISA方法，研制盐酸金霉素的免疫学检测试剂。本实验主要内容及结果如下：1.盐酸金霉素人工抗原制备及鉴定采用戊二醛法和碳二亚氨法（EDC）将CTC与BSA及OVA进行偶联，制备人工抗原BSA-CTC及OVA-CTC。紫外扫描检测器（UV）和凝胶电泳仪器（SDS-PAGE）对人工抗原进行鉴定，间接和阻断ELISA鉴定盐酸金霉素多抗血清。实验结果表明EDC法人工抗原BSA-CTC及OVA-CTC成功制备；受免的5只BALB/C小鼠效价均达1×10-3以上，获得了高效价、高特异的多抗血清。其中3号小鼠多抗血清为强敏感，半数抑制浓度(50%inhibitiveconcentration，IC50)为71.47ng/mL，与同系物四环素交叉反应率为1.662%，与同系物土霉素交叉反应率为0.714%和其他同系物及其它类药物交叉反应率小于0.08%。通过实验获得高效价、高特异性的盐酸金霉素多克隆抗体（CTCpAb）。2.盐酸金霉素单克隆抗体制备及建立免疫学特性方法选高效价、高特异性3号小鼠为细胞融合备用鼠，将小鼠脾细胞与NS0骨髓瘤细胞进行细胞融合，成功筛选6H5-H4，6H5-B2，3G9三株高效价、高特异的杂交瘤细胞株，采用体内诱生腹水法制备盐酸金霉素单抗（CTCmAb）。通过试剂盒亚型鉴定，单抗亚型为IgG1；6H5-H4，6H5-B2，3G9三株单抗细胞上清效价分别为1:1.2×102、1:1.0×102和1:0.8×102，其中6H5-H4细胞株制成腹水效价为1:2.5×104，盐酸金霉素单克隆抗体亲和常数Ka为4.05×1010L/moL，对盐酸金霉素的半数抑制为29.86ng/mL；与同系物四环素交叉反应率为1.48%，与其他同系物及其它类药物无交叉反应。通过实验获得高效价、高特异性的盐酸金霉素单克隆抗体（CTCmAb），应用于食品中盐酸金霉素残留快速检测的免疫学试验。3.建立盐酸金霉素免疫学快速检测方法根据酶联免疫分析方法，成功组装盐酸金霉素试剂盒（CTC-Kit）。试剂盒呈S型标准曲线，符合线性拟合，半数抑制IC50为29.86ng/mL，在盐酸金霉素标准品添加牛奶及猪肉样品时，回收率为83.69%及82.93%。CTC-Kit具有稳定、快速和特异等优点，广泛用于检测食品中盐酸金霉素定性与定量残留检测。