论文部分内容阅读
目的口腔扁平苔藓(Oral Lichen Planus,OLP)是一种常见的口腔粘膜疾病,病变可呈条纹状、斑块状的白色损害以及糜烂、萎缩等多种表现,以基底细胞液化变性和固有层炎性细胞浸润为主要病理特征。尽管OLP的病因不明确,但目前多认为OLP可能是一种由T细胞介导的免疫反应性疾病。Th17细胞是近年来新发现的辅助性T细胞亚群,在参与机体防御细菌感染、介导慢性炎症、自身免疫疾病和肿瘤发病中发挥重要作用。维甲酸相关核孤儿受体RORγt是Th17细胞的特异性转录因子,调控着Th17细胞的分化和发育,并且控制Th17效应性细胞因子IL-17的表达。共刺激分子4-1BB/4-1BBL介导的共刺激信号提供了T细胞活化的第二信号,可以诱导T细胞的活化、增殖及抗凋亡,维持T细胞的长期生存及提高细胞因子的分泌。T细胞与APC表面的共刺激分子受体与配体间的相互作用对于T细胞的活化,促进T细胞介导的免疫应答是至关重要的,并且这一双向信号的调控机制对防止T细胞过度活化和维持适度性具有重要意义。本课题应用实时荧光定量RT-PCR检测口腔扁平苔藓患者和健康人外周血RORγt和4-1BB/4-1BBL mRNA的表达,从转录水平上了初步探讨了RORγt和共刺激分子4-1BB/4-1BBL是否参与了口腔扁平苔藓的发病,进一步为口腔扁平苔藓的发病机制提供可能的理论依据。方法实验组30例OLP患者外周血标本来自宁夏医科大学附属医院口腔科门诊初次就诊的OLP患者,均经病理确诊,并排除合并其他自身免疫性疾病,未接受任何激素和免疫抑制剂治疗。对照组30例健康人外周血标本来自自愿者捐献,均无全身及口腔黏膜疾病诊断,肝肾功能正常。研究对象抽取外周静脉血,采用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测外周血中RORγt mRNA和4-1BB/4-1BBL mRNA的表达状况。所有数据应用SPSS13.0统计软件分析,两组间比较选用t检验,P<0.05有统计学意义。相关性采用Pearson相关分析法。结果1.在口腔扁平苔藓患者组中,RORγt和4-1BB/4-1BBLmRNA表达水平均高于健康对照组,经统计学分析,均有显著性差异(P<0.05);结果经2-ΔΔCT转换后,口腔扁平苔藓组3种基因mRNA表达水平分别是健康对照组的3.087、3.320和4.005倍;2.在口腔扁平苔藓患者组中,RORγt mRNA和4-1BB mRNA的表达水平经Pearson相关性分析,显示无明显相关性(P=0.073>0.05)。3.在口腔扁平苔藓患者组,4-1BB和4-1BBL mRNA表达水平进行Pearson相关性分析,结果显示两者呈正相关(r=0.4550, p=0.0115<0.05)。结论1.口腔扁平苔藓患者外周血中RORγt mRNA呈高表达,表明Th17细胞数量可能增多,免疫损伤因素增加,说明OLP患者体内存在Th17/Treg细胞失衡,介导炎症反应的Th17细胞与介导免疫耐受的Treg细胞之间的平衡破坏是该病发生机制中的一个重要因素。2.口腔扁平苔藓患者外周血中共刺激分子4-1BB、4-1BBLmRNA的表达异常增高,表明4-1BB/4-1BBL可能参与OLP的起病,OLP患者外周血中可能存在CD4+T细胞的活化、增殖和分化异常,阻断该共刺激通路有望为OLP的治疗提供新思路。3.在口腔扁平苔藓患者组,4-1BB和4-1BBL mRNA表达水平呈正相关,表明当机体受到外界免疫刺激后,引发了共刺激信号4-1BB/4-1BBL的异常激活,使两者表达均增高,提示这对共刺激分子表达水平的共同升高可能在OLP的发病中起一定的作用。