麝香乌龙丸对佐剂性关节炎大鼠软骨组织形态及OPG、RANKL表达的影响

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目的观察麝香乌龙丸对AA大鼠软骨组织形态及OPG、RANKL的影响,探讨麝香乌龙丸对RA软骨破坏和修复的可能作用机制。方法1.分组、造模:将30只Wistar大鼠适应性喂养1周后,按体重由小到大编号,依随机数字表分为三组:A.正常对照组B.AA模型组C.麝香乌龙丸治疗组,每组动物10只,雌雄等半。实验开始先将FCA振摇混匀,B、C组大鼠右后足跖底部皮肤常规消毒后,皮内注射FCA0.1 mL/只(10mg/ml),造模后1~3d右后足出现原发性肿胀,12~14d后出现继发性肿胀,伴鼠尾、耳、前肢及左后肢出现红肿或结节,四肢活动出现障碍,视为造模成功。A组大鼠同样方法注射生理盐水0.1mL/只作为正常对照。2.给药:造模后第15天开始给药。C组按成人用药量的10倍剂量作为大鼠等效剂量,即麝香乌龙丸1.0g/kg/d;A、B组灌入等量生理盐水。3. HE染色观察软骨组织病理变化并进行评分,免疫组织化学检测OPG、RANKL的表达。结果1.光镜观察软骨组织病理形态学改变:A组关节软骨表面光滑平整,无剥脱现象;软骨细胞无减少,排列整齐。B组关节软骨变薄,可见明显的表层组织变性、坏死,软骨面剥脱,软骨下骨暴露;软骨细胞减少、排列紊乱并见大量炎细胞侵润。C组关节软骨破坏程度较轻,剥脱软骨面较平整,软骨基质未见明显改变;软骨细胞无明显减少,可见少量炎细胞。病理积分正常组1.3±0.483、模型组3.5±0.527、治疗组2.9±0.568。模型组、治疗组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),治疗组与模型组比较亦有明显差异(P<0.05)。2. OPG、RANKL的平均光密度及细胞阳性率:OPG的平均OD值正常组(0.279±0.010)高于模型组(0.152±0.025),差异有统计学意义(P<0.01);治疗组(0.286±0.011)高于模型组(P<0.01);治疗组、正常组间相比,差异无统计学意义(P>0.05)。OPG的阳性率正常组(18.70±1.97%)低于模型组(22.76±1.73%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗组(25.31±2.75%)高于模型组(P<0.05);治疗组阳性率亦明显高于正常组(P<0.01)。RANKL平均OD值正常组(0.510±0.033)低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组(0.594±0.010)低于模型组(P<0.01);治疗组高于正常组(P<0.01)。RANKL阳性率正常组(21.35±2.06%)低于模型组( 40.63±4.26%) ,差异有统计学意义(P<0.01) ;治疗组(36.86±3.04%)低于模型组(P<0.05);治疗组高于正常组(P<0.01)。结论麝香乌龙丸能延缓佐剂性关节炎大鼠关节软骨的破坏,促进软骨修复;实验结果表明该药对佐剂性关节炎大鼠软骨组织的作用机制与上调软骨组织中OPG及下调RANKL的表达,进而调节OPG/RANKL的比例有关。
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