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灵芝是一种珍贵的药、食两用真菌,具有补中益气、滋补强体、延年益寿等功效。灵芝多糖是灵芝的主要活性成分,具有抗氧化、抗衰老和调节机体免疫等多种生物活性。本文对不同产地灵芝子实体的化学成分及其粗多糖的体外抗氧化活性进行了对比分析,研究了灵芝子实体多糖的提取工艺、分离纯化及理化性质,主要研究结果如下:(1)通过对不同产地灵芝子实体的化学成分进行测定,结果表明:安徽1号样的碳水化合物含量、能量、锗含量、蛋白质含量、氨基酸总量、必需氨基酸总量、不饱和脂肪酸所占比例、灵芝酸A、B总含量都高于吉林1号样和吉林2号样两种灵芝子实体。(2)采用ABTS自由基清除法、DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法和铁氰化钾法4种方法,分别对3种不同产地灵芝子实体(安徽1号样、吉林1号样、吉林2号样)粗多糖和1种灵芝菌丝体胞外粗多糖的体外抗氧化活性进行评价。结果表明:四种粗多糖均具有抗氧化能力。安徽1号样粗多糖对ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力最强,其对应EC50值分别为1.50mg·mL-1和2.09mg·mL-1；相同浓度下安徽1号样粗多糖的还原力最强;灵芝菌丝体胞外粗多糖对羟基自由基的清除能力最强,其EC50值是1.29mg·ml-1。由此可见,四种粗多糖的抗氧化活性不同,其中安徽1号样粗多糖的综合抗氧化活性最强。(3)通过单因素实验和响应面优化,得出安徽1号样多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度为100℃,液料比为21 mL/g,提取时间为2.5 h,提取次数为3次。在此最佳工艺条件下,多糖得率为1.54±0.04%,该值接近预测值1.529%,说明试验结果与模型符合程度良好。(4)安徽1号样粗多糖经DEAE-650离子交换树脂和葡聚糖凝胶G-100树脂的分离纯化,得到三种纯化多糖组分GLP-1、GLP-2、GLP-3。对GLP-1、GLP-2、GLP-3进一步研究发现其红外光谱扫描、紫外光谱扫描和基本理化性质都具备多糖类化合物的一般特征。HPLC柱前衍生化分析其单糖组成,结果表明:GLP-1由5种单糖组成,分别是甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖;GLP-2和GLP-3由8种单糖组成,分别是甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖。