重组酯酶对映选择性水解二羧酸酯制备(S)-苯乙二醇

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在化学和制药工业中,苯乙二醇是非常重要的手性砌块。由于苯乙二醇中含有两个羟基,利用化学法制备光学纯的苯乙二醇时,需要对一个羟基进行选择性保护。因此,利用生物法制备光学纯苯乙二醇就成为了研究的热点。本文以苯乙二醇二乙酸酯为模型底物,从土壤中和实验室保藏的菌种中筛选对映选择性水解模型底物的菌株。本实验室构造的一株表达枯草芽孢杆菌(ECU0554)酯酶的重组大肠杆菌对模型底物表现出高度的催化活性,产物具有高得率和高ee值。以重组整细胞作用于带有不同链长酰基(乙酰基、丁酰基、己酰基)的二羧酸酯时,其对苯乙二醇二乙酸酯表现出最佳的催化性能(对映选择率E=176)。对水解模型底物的反应条件进行了优化,在最佳反应条件下,底物浓度为100mM时,1h时转化率达49%,产物(S)-苯乙二醇ee值为96%。以重组整细胞为催化剂,在150ml反应体系中进行了(S)-苯乙二醇的克级制备,产物粗品得率49%,ee值为95%;经氯仿重结晶后,产品ee值>99%,最终产率45%。这些结果表明,该重组酯酶在(S)-苯乙二醇的生产中是一种有应用前景的生物催化剂。
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