酿酒酵母锚定表达糖化型淀粉酶

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chaos32167
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
糖化型淀粉酶是一类酶的总称,共同特点是可以将淀粉水解成麦芽糖或葡萄糖。在啤酒酿造、淀粉糖浆等食品领域有着广泛的应用。酿酒酵母自身没有分泌淀粉水解酶系的功能,不能直接利用淀粉。近年来,随着分子生物学技术的发展,构建可直接分解淀粉的酿酒酵母越来越受到人们的重视。另一方面,酿酒酵母表面展示技术(Yeast surfacedisplay technology)作为目前公认的安全、高效的微生物表面展示系统,在现代生物催化过程中越来越受到重视。本研究以酿酒酵母SA为宿主,利用表面展示技术,将糖化型淀粉酶锚定在酿酒酵母细胞表面,既实现了酿酒酵母对淀粉的直接降解利用,又实现了淀粉酶的新型固定化,使其作为全细胞反应催化剂可进行重复利用。主要内容包括:本文利用分子生物学手段,将来源于米根霉的α-淀粉酶和大麦β-淀粉酶基因分别与酿酒酵母的α-凝集素基因融合,成功构建了两种基因的锚定表达质粒。将两种重组质粒分别导入受体酿酒酵母SA中,筛选获得展示真菌α-淀粉酶的重组菌SAA和展示β-淀粉酶的重组菌SBA,酶活分别达到128U/g干细胞和131U/g干细胞。对两株重组酿酒酵母产生的表面展示淀粉酶进行了酶学性质分析。表面展示的米根霉α-淀粉酶和大麦β-淀粉酶的最适反应温度分别为55℃和50℃;最适反应pH范围为5.0-5.5;在60℃以下两种重组酶均表现出较好的稳定性;在30℃处理1h,表面展示的β-淀粉酶在pH3.0-10.0保持良的稳定性,保持90%以上的水解活力,表面展示真菌α-淀粉酶在pH4.0-7.5之间稳定。Fe3+对表面展示的两种重组淀粉酶均有显著的抑制作用。对锚定表达糖化型淀粉酶的重组酿酒酵母进行初步应用研究,重组菌SAA和SBA均能有效的利用淀粉进行生长和发酵。作为固定化酶的新形式,能进行重复利用。将全细胞催化剂应用于麦芽糖浆的生产,配制20%麦芽糊精,加普鲁兰酶和20U/g底物的表面展示β-淀粉酶,在pH5.0、40℃条件下糖化24h,反复利用5次,仍能制备麦芽糖含量在45%以上的麦芽糖浆。同时考察其对麦汁、淀粉辅料麦汁和全淀粉营养液的利用能力,结果表明重组酵母表现出良好的发酵性能,能有效的降低发酵液中得的残糖,提高酒精得率,对于提高原料利用率具有较显著的经济效益。
其他文献
中国淡水鱼产量居世界首位,但淡水鱼深加工技术及装备相对滞后。本文以风干鲢鱼为原料,经高压蒸煮、打击成绒、压缩成型、干燥等工序生产一种即食型的方便食品鱼松块,提高淡
翻译是一项很复杂的活动,作为人类生活的一部分,是不同文化之间传递信息的桥梁。翻译涉及很多因素,影响翻译过程及结果的最关键因素是译者、源语文本、语言文化及目标语读者
文章首先介绍了乌鲁木齐市生鲜农产品配送系统的现状,然后通过选择影响乌鲁木齐市生鲜农产品配送系统需求、供给及相关产业等13个指标构建区域物流评价的指标体系,以2014年乌鲁
在青铜器上进行嵌错工艺早在我国殷商时期就有出现,到春秋以降,随着铁器的推广使用,青铜錾刻变得更加容易,因此金银镶嵌工艺得到了长足发展。楚作为先秦大国,自春秋晚期开始向南扩
期刊
探讨不同温度下养殖大黄鱼背、腹部挥发性成分的差异。运用电子鼻和顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)对其挥发性成分进行定性定量分析。结果表明,新鲜
随着图书馆研究越来越趋向精细化和专业化发展,医院图书馆作为图书馆的重要分支,承担着提供专业书籍和分散阅读压力的重要作用。医院图书馆传统的服务模式己经难以适应广泛读
米胚作为大米加工生产的副产物,其中含有大量的蛋白质和脂肪,还含有多种维生素和人体所需的微量元素,营养价值与大豆相近,是一种很好的食品原料。本文以米胚为原料,采用Osbor
[目的]观察运用子午流注纳子法按揉背俞穴对腹腔镜术后病人胃肠功能的影响。[方法]将60例妇科腹腔镜术后病人,按随机数字表法分为对照组、按揉组、择时按揉组,每组20例。对照
目的探讨双相障碍Ⅰ型与双相障碍Ⅱ型患者在情感气质特征的差异性。方法选取100例双相障碍Ⅰ型患者(双相Ⅰ型组),98例双相障碍Ⅱ型患者(双相Ⅱ型组)和120名健康者(对照组),采
在动物防疫监督的工作中,经常遇到死亡的动物尸体,判断动物尸体的各种变化对确定动物死亡的原因、时间、疫病的性质和种类等都具有重要的意义.在动物防疫监督工作中,对动物死
期刊