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DNaseⅡ（脱氧核糖核酸酶Ⅱ）是核酸内切酶,可以参与细胞凋亡。为了使DNaseⅡ蛋白具有更好地参与促进肿瘤细胞凋亡的活性,本实验首次构建了LHRH-TAT-DNaseⅡ（PLTD）重组蛋白。其中LHRH可作为导向部分,靶向结合肿瘤细胞。TAT蛋白转导域作为跨膜转运载体,将DNaseⅡ转运至肿瘤细胞内,使DNaseⅡ在细胞内发挥细胞凋亡作用。本试验从鼠脾脏提取总RNA,反转录cDNA,扩增DNaseⅡ基因,然后将DNaseⅡ基因克隆至pMD18-T载体,继而克隆至pET-28a表达载体,重组质粒pET-DNaseⅡ转入BL21（DE3）进行表达。提取包涵体,进行初步纯化后检测发现DNaseⅡ具有消化底物λDNA的酶活性。在重组质粒pET-DNaseⅡ的基础上,成功地构建了重组表达质粒pET-28a-LHRH-TAT-DNaseⅡ（PLTD）,将阳性重组质粒转化表达受体菌BL21（Rosseta）感受态细胞中进行表达,所表达的PLTD蛋白占菌体总蛋白的60.7%,而且PLTD重组蛋白具有消化λDNA的酶活性。纯化后的PLTD重组蛋白对不同类型的肿瘤细胞增殖具有抑制作用。免疫组化分析显示表明PLTD重组蛋白在细胞可定位于细胞膜、细胞质和核膜,作用肿瘤细胞后,细胞有凋亡现象。在BALB/c小鼠腹腔中接种SP2/0细胞,每天一次连续腹腔注射PLTD重组蛋白。PLTD重组蛋白对BALB/c腹腔中的SP2/0细胞具有明显的抑制作用,随剂量增高,抑制作用明显增强。在BALB/c鼠的背部皮下接种SP2/0细胞成瘤后,每天一次连续静脉注射PLTD融合蛋白,PLTD融合蛋白对SP2/0抑瘤率达77.03%（蛋白浓度5mg/kg）,量效关系明显。本研究成功构建了PLTD基因原核表达载体并获得了高效表达,表达的PLTD蛋白具有DNaseⅡ生物活性。PLTD蛋白可以进入肿瘤细胞,对肿瘤细胞有诱导凋亡的作用,而且PLTD蛋白对移植于动物体内的肿瘤细胞具有明显的抑制作用。本研究可望成为探索肿瘤治疗的新途径。