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目的本实验旨在探究乳腺癌中ING4和MMP-9的表达情况,分析二者之间的相关性及临床意义,为判断乳腺癌的转移潜能、预后及指导患者临床个性化治疗等提供一定的理论依据。方法1.免疫组织化学法检测83例乳腺癌组织中ING4和MMP-9的表达,分析其与患者临床病理学特征的关系及二者之间的相关性。2.将ING4-siRNA转染到已培养好的乳腺癌细胞MDA-MB-231内,实验分三组:转染ING4-siRNA组(实验组)、Control-siRNA组(对照组)和未转染的空白组。3.Real-time PCR检测ING4基因m RNA情况,Western-blot检测蛋白表达情况,以判断转染效果并筛选出ING4缺失的细胞。4.Transwell侵袭实验和迁移实验检测ING4沉默后对MDA-MB-231细胞的侵袭、迁移的影响。5.Western-blot检测三组细胞中ING4沉默后MMP-9蛋白的表达情况。结果1.83例浸润性乳腺癌组织中ING4和MMP-9的阳性表达率分别为43.4%(36/83)和73.5%(61/83),二者的表达与患者的组织学分级、有无淋巴结转移、肿瘤临床TNM分期有关(P<0.05),ING4的表达与MMP-9的表达呈负相关。2.Real-time PCR检测结果表明:三组MDA-MB-231细胞中,转染ING4-siRNA组ING4的m RNA表达量明显低于其他两组,差异有统计学意义(P<0.01);而Control-siRNA组和空白组ING4的m RNA表达量之间无明显统计学差异(P>0.05)。3.Western-blot检测三组MDA-MB-231细胞的结果:转染ING4-siRNA组ING4蛋白表达量明显低于另外两组,差异具有明显统计学意义(P<0.01);而Control-siRNA组和空白组的ING4蛋白表达量之间无显著性差异(P>0.1)。4.Transwell侵袭实验结果表明:实验组、对照组和空白组穿过基质胶和滤膜的细胞数分别为(215.35±8.12)、(118.50±5.03)和(119.72±6.20)个,三组之间差异有统计学意义(P<0.01),三组相比,实验组分别比对照组和空白组的穿膜细胞数多。Transwell迁移实验结果表明:实验组、对照组和空白组的穿膜细胞数分别为(348.14±10.56)、(238.32±5.12)和(251.23±7.02),差异有统计学意义(P<0.01),实验组穿膜细胞数明显高于另外两组。而对照组和空白组之间无明显差异(P>0.1)。5.Western-blot检测结果显示,转染ING4-siRNA组经ING4沉默后MMP-9蛋白表达量明显上调,差异有明显的统计学意义(P<0.01)。结论1.ING4和MMP-9的表达与乳腺癌的发生、发展密切相关,二者可存在相互协同作用,临床上将两者联合检测可能为乳腺癌早期诊断和临床个性化治疗及预后提供一定的参考。2.ING4表达降低或缺失不仅能促进乳腺癌细胞的侵袭与转移,而且还能上调MMP-9蛋白的表达。