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白背毛木耳隶属于真菌门、担子菌纲、木耳目、木耳科,生于热带、亚热带地区,在温暖、潮湿季节丛,全国范围内分布广泛。多糖作为白背毛木耳的主要功能性成分,具有抗氧化、抗癌、降血糖和降血脂等多种生理活性,因此,白背毛木耳多糖(APP)可以开发成临床药物及保健品,市场前景广阔。本文以白背毛木耳为原料,确定了APP的超声-微波辅助提取最佳工艺参数,考察了APP的流变特性及理化性质,对APP进一步分离纯化,筛选出抗肿瘤活性强的组分APP3a,对其进行羧甲基化修饰,探讨最佳修饰工艺,并探讨了羧甲基化修饰前后多糖的抗肿瘤活性,主要的研究结果如下:1.通过响应面法优化确定超声-微波辅助提取APP的最佳工艺参数:液料比22(mL/g),时间15 min,微波功率60 W,在该条件下,多糖得率为4.13%,纯度为47.98%。2.APP为白色絮状物,无味,能溶于水,不溶于乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂,不含蛋白质和酚类物质。流变特性研究表明APP的黏度随其浓度的增大而升高,在一定温度范围内,随其温度的升高而降低。当APP浓度大于0.5%时,其黏度随剪切速率的增加而减小,出现“剪切稀化”现象,表现为“非牛顿流体”,且具有“假塑性”。pH对APP黏度的影响较大,加热时间、冻融变化、金属离子和蔗糖添加量对其黏度的影响较小。3.对APP进行纯化并对其组分进行抗肿瘤活性筛选,经DEAE-52 cellulose柱分离纯化得到4个多糖组分:APP1为中性多糖,APP2、APP3和APP4为酸性多糖,多糖回收率为87.6%。对四个组分进行体外抗肿瘤活性筛选,筛选出抗肿瘤活性较高的组分APP3。APP3经过Sephadex G-200凝胶色谱柱洗脱分离,得到单一组分APP3a,HPLC鉴定表明APP3a为均一组分。APP3a的相对分子质量为21242 Da,单糖组成为Ara、Man、Glc、Gal,其摩尔比为1:1.33:1.06:1.23。热重分析表明APP3a在160-500℃之间发生分解,出现快速失重。4.研究了APP3a羧甲基修饰的工艺及其体外抗肿瘤活性。确定APP3a羧甲基修饰最佳修饰工艺参数为:APP3a 60 mg,介质为异丙醇,氯乙酸1.45 g,NaOH量2.48 g,反应温度55℃,反应时间3.5 h,在该工艺条件下,CM-APP3a取代度为0.892。体外抗肿瘤活性研究表明APP3a和CM-APP3a处理48 h均能抑制HepG2细胞的生长,且随着APP3a和CM-APP3a浓度的增大,抑制作用越大,呈现剂量效应关系,在浓度为800 mg/mL时,APP3a和CM-APP3a对HepG2细胞生长的抑制作用最大。在相同浓度和处理时间条件下,CM-APP3a对HepG2细胞生长的抑制作用高于APP3a。APP3a和CM-APP3a在25-800mg/mL浓度范围内,处理48 h均能诱导HepG2细胞的凋亡,且随着APP3a和CM-APP3a浓度的增大,细胞凋亡率越大。在APP3a和CM-APP3a浓度为800mg/mL时,细胞凋亡率分别为19.65%和35.8%,与对照组相比有极显著的差异(p<0.01)。同APP3a相比,在相同浓度和处理时间条件下,CM-APP3a有较强的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。