【摘 要】
：
目的:研究甲基苯丙胺（methamphetamine,METH）诱导的小鼠行为敏化中多巴胺D3受体（D3R）的调控作用和基因表达变化规律,探讨不同脑区各多巴胺受体亚型（D1R–D5R）基因表达特征及其在METH成瘾中的作用,为进一步阐明METH成瘾的分子生物学机制奠定基础。方法:（1）METH诱导小鼠行为敏化模型的建立:所有实验小鼠分为4组,即野生型小鼠盐水组（WT SA组）,野生型小鼠METH组
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目《甲基苯丙胺对小鼠相关脑区神经递质的影响及D3R调控作用的机制研究》（编号:81601655）； 山西省应用基础研究项目《左旋四氢巴马汀干预甲基苯丙胺成瘾的代谢及其调控机制研究》（编号:201601D021144）；
论文部分内容阅读
目的:研究甲基苯丙胺（methamphetamine,METH）诱导的小鼠行为敏化中多巴胺D3受体（D3R）的调控作用和基因表达变化规律,探讨不同脑区各多巴胺受体亚型（D1R–D5R）基因表达特征及其在METH成瘾中的作用,为进一步阐明METH成瘾的分子生物学机制奠定基础。方法:（1）METH诱导小鼠行为敏化模型的建立:所有实验小鼠分为4组,即野生型小鼠盐水组（WT SA组）,野生型小鼠METH组（WT METH组）,D3R基因敲除小鼠盐水组(D3R-/-SA组),D3R基因敲除小鼠METH组(D3R-/-METH组)。实验过程包括4个阶段,即前测期、形成期、转换期和表达期。（2）不同脑区核团5种多巴胺受体（D1R–D5R）基因表达的变化:本实验采用中脑多巴胺神经元投射并与药物成瘾密切相关的4种脑区核团即前额叶皮质（prefrontal cortex,PFc）,伏隔核（nucleus accumbens,NAc）,尾状壳核（caudate putamen,CPu）和海马（hippocampus,Hip）作为研究对象。行为学测试结束后,颈椎脱臼处死所有小鼠,迅速分离出4种脑区核团,采用实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR）的实验方法,检测5种多巴胺受体（D1R–D5R）基因表达,利用2-△△Ct法计算各基因的相对表达水平。实验结果用均值±标准误（mean±SEM）来表示,采用SPSS 25.0统计软件进行数据分析,P<0.05为统计学显著性检验水准。结果:（1）METH对小鼠行为敏化的影响:相比于同基因型SA组小鼠,METH（2.0mg/kg）注射后,两基因型小鼠自主活动量均显著增多并产生持续性行为敏化（P<0.05）,表明滥用METH可以导致成瘾。但D3R-/-小鼠自主活动量显著低于其相应WT小鼠（P<0.05）,表明D3R的激活可能在METH成瘾中发挥正性调节作用。（2）不同脑区核团5种多巴胺受体（D1R–D5R）基因表达的变化:5种多巴胺受体在不同脑区的分布存在明显差异,即在4种脑区核团中,D1R和D2R在NAc和CPu中表达分布较多,D3R在NAc中表达分布较多,D4R和D5R表达分布无明显差异。统计分析结果表明,METH作用后,WT小鼠NAc和CPu的D1R和D2R基因表达减少（P<0.05）,D3R-/-小鼠CPu的D1R和D2R基因表达减少（P<0.05）;WT小鼠PFc、NAc和Hip中的D3R基因表达增加（P<0.05）;D4R和D5R在WT小鼠中均未发生显著性改变（P>0.05）。这些结果表明,这些受体亚型,特别是D1R、D2R和D3R,可能共同参与调控METH成瘾。结论:（1）反复持续性的METH作用可诱导小鼠产生行为敏化,提示滥用METH可以导致成瘾。行为学和基因表达结果表明D3R的激活可能在METH成瘾中发挥正性调节作用。（2）D1R–D5R在不同脑区的表达分布存在明显差异,METH作用后,这些受体亚型,特别是D1R、D2R和D3R,可能共同参与调控METH成瘾。
其他文献
目的:1.建立血液中水合氯醛、三氯乙醇的气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）检测方法和三氯乙酸的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法;2.建立水合氯醛及其两种代谢物（三氯乙醇和三氯乙酸）在家兔体内的代谢动力学模型,研究其代谢动力学规律,建立代谢动力学方程及参数;3.研究水合氯醛及其代谢物与用药时间之间的关系,建立水合氯醛用药时间的推断方法。方法:1.样品前处理1.1水合氯醛取待
目的:本研究基于我国慢性病患者的人数不断增加,经济负担重,慢性病患者专业照顾者缺乏的现状,调查护士教练培训内容的需求,在此基础上构建适合我国护士知识、经验、水平等特点的培训课程内容,为我国各地护士教练的培养及护士角色的发展提供参考依据。方法:本研究先用文献回顾法初步形成了我国护士教练培训课程内容草案;再用半结构访谈的结果对草案进行了修订,形成了我国护士教练培训课程内容指标体系的专家咨询问卷;最后借
目的:本研究立足于高等护理教育中现存的本科护生职业发展路径教育滞后于日益增长的社会发展需要、护理人才输送方定位不明确问题,引入供给侧改革理念,旨在探索出与我国现有高等护理教育资源相匹配的本科护生职业发展路径教育方案,以优化护理人才培养路径,创新高等护理教育发展模式。方法:（1）横断面现状调查:采用便利抽样于2020年3月-2020年6月抽取山西省某高等医学院校本科护生实施问卷调查,了解本科护生职业
目的:采用16s rRNA扩增子测序技术结合机器学习算法,分析大鼠死后及尸体样本肠道微生物变化与死亡时间的关系,以此推断死亡时间（postmortem interval,PMI）。方法:大鼠样本:成年雄性健康Sprague-Dewley大鼠84只,体重250300g,腹腔注射致死量戊巴比妥（350mg/kg体重）处死大鼠,死后存放于16℃、相对湿度50%±5%条件的人工气候箱。于死后0 d、1 d
目的:筛选在头发DNA中与中国北方汉族个体年龄显著相关的DNA甲基化位点并构建年龄推断模型。方法:结合近年来研究结果及现有文献,筛选出21个可能与年龄相关的多组织通用的甲基化候选位点。基于SNaPshot技术,利用低年龄组和高年龄组的6个样本再次进行筛选,选择出10个峰型正常且具有年龄相关性的CpG位点用于构建多重甲基化SNaPshot分析方法。并对该体系进行种属特异性及灵敏度的检测。运用该方法检
目的:本研究旨在对前期基于中国汉族平原男性人群建立的9个CpG位点年龄推断模型在不同海拔地域、民族和不同性别人群中年龄推断的适用性进行验证及优化,以提升年龄推断的准确性和应用范围;分析检测体系的灵敏度,为实际案件检验提供数据支撑;比较Epi TYPER技术平台和焦磷酸测序检测DNA甲基化差异,探讨跨平台年龄推断模型计算方法研究。方法:1.将模型建立时选取的517份汉族男性样本分15～24岁、25～
目的:在法医学研究中,死亡时间推断（postmortem interval estimation,PMI推断）始终是重点和热点,微生物群落在尸体腐败过程中有巨大作用是毋庸置疑的。已经有研究表明,尸体腐败过程中的微生物群落演替规律可以用来估计尸体的死后时间。然而,现有的大多数研究都是针对暴露于空气中的尸体。而事实上,埋葬尸体在法医调查中是非常常见的。本研究以大鼠埋葬尸体作为研究对象,采用高通量测序技
目的:了解国外护理模拟教学引导者认证相关内容,结合国内护理模拟教学引导者发展现况,初步构建符合我国护理专业特点及教师自身知识经验特点的护理模拟教学引导者认证体系,为护理模拟教学引导者专业化发展提供参考依据。方法:本研究采用文献回顾法、半结构式访谈法、德尔菲专家咨询法、层次分析法和比例分配法构建护理模拟教学引导者认证体系,并确定各个指标的权重。通过NVivo 7.0质性资料分析软件、Excel 20
目的:1.建立大鼠血浆、组织脏器中士的宁（STR）及其代谢产物士的宁氮氧化物（SNO）的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法。2.建立士的宁和士的宁氮氧化物在雌雄大鼠体内的代谢动力学模型,研究其代谢动力学规律;研究士的宁和士的宁氮氧化物与服药时间的关系,建立士的宁服药时间的推断方法,为士的宁中毒案件的法医学鉴定提供实验依据。3.研究士的宁和士的宁氮氧化物在大鼠体内的分布规律,为士的
目的:利用精液特异性甲基化位点确证混合斑中精液的存在,同时利用精液特异性甲基化位点联合的SNP位点确证人群的多态性,并可利用这种多态性进行混合斑中精液供者的个体识别。方法:本课题先利用甲基化敏感型限制性内切酶法（MSRE）对基因组进行酶切,然后利用复合扩增技术（multiplex PCR）和单碱基延伸技术（SBE）对精液、唾液、血液、阴道分泌物特异性的甲基化位点和精液甲基化位点联合的SNP进行检测