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以猪小肠粘膜提取肝素后的下脚料为原料,采用双酶分步水解法制备动物水解肽产品,并研究其对仔猪生长性能的影响。
试验一:以水解度和可溶性蛋白含量为评价指标,比较中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶在参考条件下的酶解效果。结果表明,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的水解效果优于碱性蛋白酶。选用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行后期水解工艺的研究。
试验二:以水解度为评价指标,采用单因素试验和正交试验分别优化两种蛋白酶各自最佳的水解条件。根据试验结果,确定中性蛋白酶最佳酶解条件为:底物浓度6.6%、酶加量4240U/g 蛋白、pH7.0、温度45℃、反应时间4.4h,此条件下水解度为19.26%;木瓜蛋白酶最佳酶解条件为:底物浓度6%、酶加量3000U/g 蛋白、pH 值7.5、温度45℃、反应时间3h,此条件下水解度为20.63%。
试验三:以水解度和可溶性蛋白含量为评价指标,讨论加酶顺序对水解效果的影响,确定最终双酶分阶段水解肠粘膜的最佳水解条件。根据试验结果,适宜水解条件为:在底物浓度6%的条件,首先加入中性蛋白酶(酶加量4240U/g蛋白),在pH 值7.0、温度45℃条件下水解4h,灭酶,再加入木瓜蛋白酶(酶加量3000U/g 蛋白),在pH 值7.5、温度45℃条件下水解3h。在此条件下,水解度达40%,可溶性蛋白含量为77.76%。
试验四:将双酶分步水解获得的水解液经喷雾干燥制备成肠膜蛋白粉(DPS)产品,对自制DPS 进行检测分析,以评价产品品质。结果表明,自制DPS 与进口DPS 化学常规成分相近。自制DPS 中肽蛋白得率达46.37%,其中2-6 肽占主要部分,优于进口DPS。试验五:分别以全鱼粉作主要动物性蛋白源的基础日粮为对照组,自制DPS(3.5%替代鱼粉)和进口DPS(3.5%替代鱼粉)作主要动物性蛋白源的基础日粮为实验组,饲喂35 日龄仔猪14d 后,结果表明,试验组仔猪平均日增重、平均日采食量显著高于对照组,料肉比显著低于对照组,试验组之间差异不显;血液中的蛋白含量差异不显著,试验组较对照组有升高的趋势;试验组血液中尿素氮的水平有显著降低;试验组中碱性磷酸酶含量较对照组也有显著提高;乳酸脱氢酶含量降低。因此,添加肠膜蛋白粉对仔猪生长性能有促进作用。自制肠膜蛋白粉与进口产品有相同的饲喂效果。