烟粉虱通过刺吸破坏植物韧皮部取食或直接吸食植物叶片传播植物病毒,同时烟粉虱分泌蜜露诱发煤污病和黄化病危害植物。烟粉虱（Mediterranean,Q型）MED隐种已对许多已登记的不同类别杀虫剂产生高度且稳定的抗性,但Q型烟粉虱耐药性具体生化机制尚未阐明。为了确定可用于开发嗅觉诱饵、烟粉虱检测和监测的潜在挥发性化合物和制定烟粉虱新的管理策略。研究发现气味结合蛋白（Odorant Binding Proteins,OBPs）是嗅觉引诱剂的良好目标,但目前未有烟粉虱气味结合蛋白（Bemisia tabaci,Btab OBP）作为分子靶标的报道。因此本研究以重组烟粉虱气味结合蛋白（Recombinant Odorant Binding Proteins,rBtabOBP）作为体外药剂筛选模型的潜在靶标。方法:通过原核表达rBtabOBP获得目标蛋白,采用蛋白免疫印迹和质谱鉴定技术鉴定蛋白。建立基于rBtabOBP为潜在分子靶标的离体药物筛选模型。一方面利用微量热泳动技术（Microscale Thermophoresis,MST）初步筛选含有苯并噻唑片段的氨基酮分子与植物精油小分子等化合物与rBtabOBP的结合力。随后,通过等温滴定量热技术（Isothermal Titration Calorimetry,ITC）验证具有良好结合力的小分子化合物,最后定点突变验证结合位点。另一方面,利用结构生物学技术尝试解析rBtabOBP晶体结构。具体实验结果如下:（1）原核表达rBtabOBP:设置不同温度,IPTG浓度梯度诱导蛋白表达,16℃,0.8 m M IPTG条件下,rBtabOBP8在上清中大量表达,获得目标蛋白。（2）通过Western Blot鉴定蛋白表达量和质谱鉴定原核表达获得的蛋白。（3）相互作用筛选强结合小分子化合物:根据MST和ITC测定,以研究报道与气味结合蛋白有强结合的甲基丁香酚（ME）作为对照药剂,筛选出rBtabOBP8与含苯并噻唑片段的氨基酮分子3l具有最强结合力,ITC和MST测定解离常数分别为0.21μM和0.48μM。（4）突变验证结合位点:将缬氨酸（Val）119定点突变为丙氨酸（Ala）119,构建突变质粒rBtabOBP8V119A。MST和ITC突变结果表明3l和rBtabOBP8V119A突变体之间的特异性结合丢失。因此,认为Val119是参与31和rBtabOBP8结合的关键氨基酸残基。（5）初步筛选出rBtabOBP8结晶条件,为后续解析rBtabOBP8晶体结构提供参考。综上所述,rBtabOBP8是烟粉虱嗅觉诱饵开发的潜在分子靶标,筛选出与rBtabOBP8强结合化合物3l,为设计新的嗅觉引诱剂提供思路。初步筛选出rBtabOBP8蛋白结晶条件为后续蛋白质结晶研究和应用奠定基础。