【摘 要】
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本研究针对10株猪致病性大肠杆菌,经复壮后选取致病性强的6菌株作为供试菌株,制备免疫血清与这6菌株的多种抗原分别进行交叉凝集试验和琼脂扩散试验,根据各菌株抗原的交叉反应程
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本研究针对10株猪致病性大肠杆菌,经复壮后选取致病性强的6菌株作为供试菌株,制备免疫血清与这6菌株的多种抗原分别进行交叉凝集试验和琼脂扩散试验,根据各菌株抗原的交叉反应程度,筛选出抗原交叉程度高的菌株300和343,检测两菌株超抗原的毒性作用,以不同方式制备抗原免疫仔猪,用间接ELISA检测免疫效果,并提取菌株300和343的外膜蛋白和渗透因子经SDS—PAGE及免疫印迹试验,进行相关分析。 菌株抗原交叉性试验表明,6株大肠杆菌具有共同的抗原成分,菌株抗原以O抗原为主。间接ELISA检测抗体表明,用菌株300和343制备的混合抗原的免疫效果优于300或343单一菌株抗原。 外膜蛋白是部分供试菌株的共同抗原,具有免疫性。SDS—PAGE和免疫印迹试验表明,菌株300和343的外膜蛋白具有较好的抗原性和交叉免疫性,外膜蛋白中具有免疫性的蛋白条带仅有1条,分子量为50KD。 渗透因子是一种超抗原,存在于液体培养菌液中。提取菌株300和343的渗透因子注射家兔,证明其有毒性作用。用两菌株制备的液体抗原比固体抗原的免疫原性强。经SDS—PAGE和免疫印迹试验分析,菌株300和343的渗透因子具有相似的免疫性蛋白条带2条,分子量为15KD和20KD。 大肠杆菌抗原复杂,菌株抗原以O抗原为主,K抗原和H抗原不是主导的抗原成分,外膜蛋白和渗透因子也是大肠杆菌抗原的组成部分。
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