Photolon介导的光动力疗法对小鼠子宫内膜异位症的治疗效果

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目的:探讨Photolon介导的光动力疗法(Photodynamic therapy,PDT)对Balb/c雌性小鼠子宫内膜异位细胞及内膜异位病灶的治疗效果。  方法:测量光敏剂的吸光度。将6-7周龄Balb/c雌性小鼠(体重为20g)在水合氯醛麻醉下行自体子宫内膜组织移植术,制备内膜异位模型。术后给予激素治疗促进子宫内膜异位模型的生长,当模型病灶平均大小为6mm时为构建模型成功。模型成功后原代培养Balb/c雌性小鼠在位及异位子宫内膜细胞,培养成功后分为对照组、单纯光照组、光敏剂组及Photolon介导的PDT组,在显微镜下观察各组治疗后形态变化。用MTT实验分析Photolon介导的PDT治疗对小鼠异位子宫内膜细胞的抑制率及半数致死量。随机抽取14只模型鼠分为对照组和Photolon介导的PDT组。对照组鼠尾注射200ul生理盐水,3小时后自然光照射10min; PDT组:鼠尾注射2mg/ml的Photolon溶液200ul,3h后行PDT治疗,照射剂量为2.5 J/cm2(660nm波长,1W,距离病灶表面5cm照射7min)。进行体内治疗后每隔7天测量异位病灶大小,各组5周后处死,取小鼠子宫内膜异位病灶制备病理切片,HE染色观察各组异位子宫内膜的病理改变。  结果:1.体外培养的异位子宫内膜细胞的间质细胞较在位的间质细胞小,且分散生长,细胞呈细长的纺锤形,伸展挺直装,边缘清晰,胞浆少,核较大呈椭圆形,生长迅速,生长模式似癌细胞。  2.Photolon介导的PDT治疗体外培养的异位子宫内膜细胞后细胞大量死亡,细胞原有细长纺锤形得到破坏、边界模糊、胞浆碎裂、细胞核固缩、变形甚至碎裂消失等变化。  3.不同浓度的Photolon(0.015ug/ml、0.03ug/ml、0.06ug/ml、0.125ug/ml、0.25ug/ml、0.5ug/ml)作用后小鼠异位子宫内膜细胞的抑制率(3.82%、10.64%、20.07%、40.37%、71.39%、82.02%)均高于对照组,其浓度0.160ug/ml时达到细胞半致死量。  4.对照组小鼠子宫内膜异位灶继续增大,而Photolon+PDT组异位病灶停止生长,并逐渐减小。  5.HE染色结果示:与对照相比,photolon+PDT组镜下细胞连续排列被破坏,细胞形态亦遭到破坏,胞浆比减少,部分细胞核固缩,可见泡状核和核周空晕。  结论:Photolon介导的PDT治疗能够有效抑制小鼠子宫内膜异位病灶的生长。
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