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目的:比较血清外泌体来源EGFR蛋白在NSCLC患者未治疗组与良性疾病组、手术组、健康对照组之间表达水平差异,以及比较未治疗组患者血清外泌体中EGFR与临床分期、淋巴结转移的相关性,探索外泌体来源EGFR蛋白在NSCLC早期诊断及预后评估中的应用价值。方法:纳入研究对象30例,其中15例未治疗(Untreated)、5例手术后(Surgery)、5例良性疾病(Benign)以及5例性别年龄匹配的健康对照者(Health)的血清,使用差异超速离心的方法分离血清中外泌体。透射电镜进行外泌体形态学的鉴定、Western blotting鉴定外泌体的表面标志蛋白CD9、CD63;采用Western blotting检测Untreated、Surgery、Benign、Health各组间外泌体中EGFR的表达情况;以及Untreated组血清外泌体和癌组织中EGFR蛋白表达的相关性。结果:(1)NSCLC患者血清中分离的外泌体样本电镜下为直径在50-150 nm的圆形或椭圆形双层脂质膜的微小囊泡。同时,Western blotting检测结果显示,有外泌体标志蛋白CD9、CD63的表达,轻微表达Alumin,无内质网蛋白标志物calnexin的表达。这些结果表明,本研究分离外泌体的方法可行。(2)Western blotting检测结果表明,EGFR在Untreated组血清外泌体中表达水平明显高于Benign组和Health组(P<0.01),且Benign组中EGFR的表达水平高于Health组(P<0.01);Surgery组中EGFR的表达明显低于Untreated组(P<0.01),这可能与手术切除肿瘤有关。(3)Western blotting检测结果证实,EGFR在淋巴结阳性组血清外泌体中的表达量明显高于淋巴结阴性组(P<0.01);同时,血清外泌体EGFR表达与NSCLC临床分期呈正相关(P<0.05)。(4)Untreated组血清外泌体中EGFR蛋白表达和肿瘤组织中EGFR mRNA表达水平呈一致性(r=0.821,P=0.0002)。结论:(1)EGFR在Untreated组、Surgery组和Benign组血清外泌体中表达水平高于Health组,且Untreated组中表达最高;(2)EGFR在NSCLC患者手术后血清外泌体中的表达水平下调;(3)NSCLC血清外泌体中EGFR的表达水平与患者分期和淋巴结阳性转移显著性相关;(4)Untreated组血清外泌体中EGFR表达水平与NSCLC癌组织中EGFR蛋白的表达具有显著相关性。