肠道病毒71型感染手足口病的免疫细胞和因子水平研究

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目的:
  针对肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病患儿,对感染后血清中细胞因子的改变情况、外周血中淋巴细胞亚群比例进行检测和比较,对感染后外周血单个核细胞(PBMCs)表面Toll样受体(TLRs)基因的表达情况进行研究,以期为疾病进展的监测、预后的判断以及肠道病毒71型感染所致手足口病的致病机制的研究提供临床依据。
  方法:
  选取2016年5月至2017年5月于郑州大学第五附属医院治疗的由EV71感染所致的手足口病患儿共计134例作为研究对象,按照病情程度分为轻症组和重症组,其中轻症组74例,重症组60例。选取同一时间段于我院门诊进行体检的健康儿童50例作为健康对照人群。利用流式细胞术检测所有受试对象的外周血中的T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞以及NK细胞比例;利用化学发光法检测受试对象血清中sIL-2R、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的含量。通过密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,提取mRNA,通过荧光定量PCR扩增TLR3基因和TLR7基因,分析比较其相对表达水平。
  结果:
  在淋巴细胞亚群比例方面,EV71感染手足口病患儿外周血中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞所占比例都显著低于健康对照组的儿童(p<0.05),并且重症组儿童外周血中的CD3+T细胞、CD4+T细胞比例显著低于轻症组患儿(p<0.05)。而轻症组和重症组CD8+T细胞和NK细胞的比例并没有显著差异(p>0.05);轻症组和重症组患儿的B细胞比例显著高于健康对照组儿童(p<0.05),同时重症组患儿的B细胞比例显著高于轻症组儿童(p<0.05)。
  在血清中可溶性IL-2受体(sIL-2R)和细胞因子含量方面,轻症组、重症组患儿血清中sIL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α、IL-10含量显著高于健康儿童(p<0.05),且重症患儿血清中的sIL-2R和TNF-α的含量显著高于轻症患儿(p<0.05),而轻症和重症患儿之间,血清IL-6、IL-8及IL-10的含量并无显著差异(p>0.05)。
  在TLR的表达方面:EV71感染所致手足口病轻、重症患儿之间,TLR3和TLR7的mRNA表达无显著差异(p>0.05),但手足口病患儿TLR3和TLR7的mRNA表达都显著高于同龄健康儿童(p<0.05)。
  结论:
  1、肠道病毒71型感染所致的手足口病患儿的外周血中CD3+、CD4+及CD8+T淋巴细胞的数量、NK细胞数量显著较正常儿童降低,且随着病情的加重逐渐下降,可能病情的加重与T淋巴细胞的凋亡有关。肠道病毒71型感染致手足口病患儿的外周血中B淋巴细胞数量较正常儿童显著升高,且随着病情的加重逐渐升高。
  2、肠道病毒71型感染所致手足口病患儿存在明显的免疫功能异常,TLR3和TLR7的基因表达水平显著升高,提示TLRs表达增高可能与该病毒的致病有关,是导致病情变化的因素之一。
  3、患儿血清中sIL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α含量明显升高,可能病情的加重与细胞因子异常分泌有关。
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