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背景:肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是泌尿系统三大肿瘤之一,近年来其发病率呈逐渐上升的态势。四跨膜蛋白CD82分子在多种恶性肿瘤细胞中有表达下调的趋势,其也被认为是多种肿瘤的转移抑制因子。然而,CD82在RCC中的功能及其潜在抗转移作用机制尚不清楚。因此本研究拟测定RCC中CD82的表达含量并探索它在RCC细胞系中的调控机制。方法:采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time-polymerase chain reaction,q RT-PCR)和免疫印迹(Western Blot)的方法检测30对RCC组织和癌旁组织以及人RCC细胞系和正常肾小管上皮细胞系HK-2中CD82的信使RNA(messenger RNA,m RNA)和蛋白的表达水平。用慢病毒和小干扰RNA(si RNA)过表达或敲低肾癌细胞系Caki-1和786-O细胞中CD82表达量后,进行Transwell穿膜实验和CCK-8(Cell Counting Kit-8)增殖实验以确定肾癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力改变。通过组织芯片和免疫组织化学技术对133例RCC组织样品进行CD82蛋白的检测,并根据肾癌术后病人的临床信息及随访数据,进行Kaplan-Meier生存曲线分析以评估CD82与肾癌患者预后之间的相关性。结果:定量PCR和免疫印迹的结果表明,与癌旁正常组织和正常肾小管上皮细胞HK-2相比,RCC组织和RCC细胞系中CD82的表达呈显著低表达。对133例的肾癌患者标本资料进行分析后发现,CD82蛋白表达阳性率为25.6%(34/133),其阳性表达与组织学分级(P=0.041),肿瘤分期(P=0.036)和肿瘤大小(P=0.020)显著相关。此外,体外细胞功能实验证实,过表达CD82能明显抑制Caki-1细胞的迁移侵袭能力,敲低CD82能显著增强786-O细胞的迁移侵袭能力;而肿瘤的细胞的增殖能力未有明显改变。机制研究表明,上调CD82能够通过下调TGF-β1的蛋白表达水平从而弱化TGF-β1/Smad通路的磷酸化,影响MMP家族相关蛋白的表达程度,从而抑制RCC细胞的迁移侵袭能力。挽救性实验表明,在RCC细胞中过表达CD82的基础上,加入重组人细胞因子TGF-β1(Rh TGF-β1)的刺激使TGF-β1蛋白的表达水平得到恢复,能够逆转先前被CD82抑制的肿瘤生物学行为,同时TGF-β1/Smad通路的磷酸化水平也重新强化。结论:在肾细胞癌中,CD82可作为一种转移抑制因子,通过抑制TGF-β1/Smad信号通路在肾癌的转移中发挥调控作用。CD82可为肾癌转移机制的研究提供新的思路,有望成为肾癌患者治疗的一个新型靶点。