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早期妊娠诊断技术的研究已有几十年的历史，但由于各种因素的影响，其诊断效果并不理想，利用母体识别阶段外周血液中基因的差异表达进行妊娠诊断在国内外越来越受关注。本研究通过分析干扰素刺激基因在小尾寒羊早期妊娠阶段外周血的表达规律，探讨其与早期妊娠的关系，为利用干扰素刺激基因进行早期妊娠提供理论基础和科学依据。 本试验选择20只小尾寒羊母羊，经同期发情、人工授精，在人工授精后第0d、13d、17d、24 d、30d分别采集外周血并分离出白细胞，利用实时定量PCR(RT-PCR)的方法分析干扰素刺激基因的mRNA表达水平，利用绝对定量标准曲线拷贝数对空怀和妊娠母羊不同时间段的干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene15kDaprotein，ISG15)、2-5寡腺苷酸合成酶1(2-5 oligoadenylate synthetase，OAS1)和黏病毒抵抗基因2(myxovirus resistance gene2，MX2)表达量进行分析比较。结果表明:妊娠的小尾寒羊ISG15、OAS1、MX2基因的mRNA表达量在从13d开始呈上升趋势并在17d达到高峰，24 d后逐渐下降;妊娠母羊在授精后0 dISG15和MX2基因的mRNA的表达量显著低于17 d(P＜0.05)，而其他时间点的表达量与0d无显著差异(P＞0.05);妊娠母羊授精后第17 d ISG15和MX2基因的mRNA表达量显著高于第0d、13d、24 d和30 d(P＜0.05);妊娠母羊在授精后0 dOAS1基因的mRNA表达量显著低于17d和24 d(P＜0.05)，而其他时间点的表达量与0d无显著差异(P＞0.05);妊娠母羊授精后17 dOAS1基因mRNA表达量显著高于0d、13d、30 d(P＜0.05)，但与24 d差异不显著(P＞0.05);空怀母羊各时间点ISG15、OAS1、MX2基因的mRNA表达量基本无显著变化(P＞0.05)。 为了进一步分析干扰素刺激基因(ISG15和OAS1)在蛋白水平的变化，本研究利用蛋白免疫印迹(Western blot)对空怀和妊娠后母羊不同时间的蛋白进行验证，这些蛋白均在外周血中表达，妊娠母羊ISG15、OAS1蛋白表达量从13d开始呈上升趋势，并在17d达到高峰，24 d后下调;妊娠母羊授精后0d ISG15蛋白表达量显著低于13d、17d和30 d(P＜0.05)，而其他时间点的表达量与0d无显著差异(P＞0.05);妊娠母羊授精后0d OAS1蛋白表达量显著低于13d和17 d(P＜0.05)，而其他时间点的表达量与0d无显著差异(P＞0.05);妊娠羊授精后17 d ISG15和OAS1蛋白表达量显著高于24 d和30d(P＜0.05)，而与13d相比差异不显著(P＞0.05)。空怀母羊第17d采集样品检测表明，ISG15蛋白表达量为0.2±0.1，OAS1蛋白表达量为0.28±0.09，与怀孕羊相比差异显著(P＜0.05)。 综上所述，干扰素刺激基因ISG15、OAS1、MX2表达量在小尾寒羊受精后17d最高，可为进一步建立新型早期妊娠诊断方法奠定基础。