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目的:组织蛋白酶S(CTSS)已经被报道可以增加众多恶性肿瘤的表达及肿瘤活性。然而沉默CTSS诱导肝癌细胞MHCC97H凋亡的作用机制目前尚不清楚。 方法:采用已获得的肝癌细胞系作为基础的研究实验系统来评价CTSS在人肝癌细胞中的作用和相关机制，利用荧光定量PCR和Western blot筛选高表达CTSS的肝癌细胞系;利用慢病毒干扰CTSS及其受体蛋白酶激活受体-2（PAR2）的表达，并通过流式细胞仪检测其凋亡，利用Western blot检测其NF-κB通路的变化;利用蜂毒素和多柔比星药物干预进行对比研究观察，利用流式细胞仪及Western blot分别评价沉默CTSS后对药物敏感性变化的情况，并检测Caspase3蛋白的激活情况;最后利用裸鼠皮下移植瘤模型评估沉默CTSS后，肝癌细胞在体内的生长及对蜂毒素敏感性的分析，利用ELISA法检测Caspase3活性。 结果:在13株肝癌细胞系中，CTSS在MHCC97-H中表达最高。利用慢病毒介导的小分子干扰技术转染沉默CTSS基因表达的PLVT1150中，CTSS基因及PAR2的mRNA和蛋白质含量相应地显著性减少;相反，过表达CTSS基因的PSB880中， CTSS基因及PAR2的mRNA和蛋白质含量相应地显著性增加。从而可以推测PAR2及CTSS基因之间存在正相关的关系。沉默CTSS基因的MHCC97-H细胞中，NF-κB信号通路的活性被抑制，可以观察到更多的MHCC97-H细胞的凋亡(30.07％±1.8vs.18.58％±1.6);但沉默CTSS过表达PAR2可使其凋亡率下降(30.07％±1.8vs.19.72％±1.5)。在MHCC97-H细胞中分别使用两种可引起细胞凋亡药物，蜂毒素（0，4和8μg/mL）处理30min，多柔比星（0和5μg/mL）处理24h，观察两种药物对shCTSS和对照组细胞凋亡率。与对照组相比，PLVT1150细胞对蜂毒素（18.87％±2.1vs.4.27％±1.9，36.72％±2.2vs.15.32％±1.7，52.98％±1.5vs.28.86％±2.2）和多柔比星（19.13％±2.0vs.3.84％±1.4，71.83％±2.5vs.32.66％±1.2）更敏感。沉默CTSS后，活化的Caspase-3显著增加，表明CTSS与MHCC97-H细胞凋亡相关联。在裸鼠体内研究中，蜂毒素协同CTSS沉默可以显著抑制肝癌的生长，并对蜂毒素引起的凋亡更加敏感。 结论:慢病毒介导的沉默CTSS可以显著诱导MHCC97-H细胞的凋亡和增加化学药物敏感性。这使得CTSS成为肝癌治疗的潜在分子靶点，并为肝细胞癌的治疗提供了一个有吸引力的抗癌策略。