肾盂输尿管连接部神经节细胞及神经纤维的分布观察

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背景及目的在术中,有术者发现部分肾盂输尿管连接部管腔通畅,并无狭窄与扩张,而患侧肾脏积水,离断式肾盂输尿管成形术后仍有2.5%出现肾积水加重,二次手术术中发现连接部管腔存在,无狭窄,但肾积水仍然存在。有人认为感染引起的,有人则认为切除范围不够,连接部蠕动功能不良引起。我们本次研究肾盂输尿管连接部梗阻段,主要是通过HE及免疫组化,观察肾盂输尿管连接部的神经节细胞、神经纤维的形态和分布情况,分析梗阻形成的原因,确定梗阻的部位及范围,选择最佳的手术方式,评价远期疗效具有重要意义。方法(1)收集我科2010年6月-2011年4月以“先天性肾盂输尿管连接部梗阻性肾积水”患儿,经术前影像学诊断,术中确诊为肾盂输尿管连接部梗阻,共有20例患儿,取肾盂输尿管连接部作为实验组,再取同一患者肾盂输尿管连接部输尿管切缘端作为对照组,取10例肾母细胞瘤无肿瘤浸润、外伤性肾损伤切除术后正常输尿管作为正常组。全部标本经福尔马林溶液固定,石蜡包埋,切片。(2)试验方法:所取各组组织均行HE染色,光镜下观察该段组织的神经节细胞,应用免疫组化S100检测神经纤维在实验组及对照组中的表达,每张切片先在低倍镜(200×)的视野中找到组织切片内神经纤维密度集中的区域,随机选取三个区域;然后在高倍镜(400×)视野下分别计数神经纤维的个数。分辨不清的不计入计数结果。计数由一名病理科主治医师和一副主任医师采用双盲法分别对同一组织切片进行计数,取两者计数中较高数据作为该片的计数结果。结果用均数±标准差表示。计数视野中阳性神经纤维数,可疑均计数在内,分辨不清不计入计数结果。(3)运用SPSS13.0统计分析软件对各项指标的数据进行分析,三个样本的均数比较采用单因素方差分析,计量资料以均数±标准差( x_±s)表示,P <0.05表示具有统计学意义。结果(1)通过HE染色,全部标本均通过在光镜下观察,三组标本均未发现神经节细胞存在。(2)(2)S100显色显示神经纤维在不同组间的数量差异,3组样本均通过免疫组化,观察阳性神经纤维。在高倍镜下进行计数。结果显示手术切除的肾盂输尿管连接部梗阻段神经纤维明显较同一患儿输尿管手术切缘分布密度低。统计分析提示实验组与对照组、实验组与正常组的比较均有统计学差异(P<0.05);对照组与正常组的比较无统计学差异(P>0.05)。结论(1)HE观察肾盂输尿管连接部、输尿管切缘及正常组组织未发现神经节细胞。(2)实验组、与对照组的神经纤维分布存在差异性。(3)对照组与正常组的神经纤维的分布无明显差异。
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