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禽呼肠孤病毒(Avian reovirus，ARV)感染在世界范围内存在，主要引起鸡和火鸡的病毒性关节炎＼腱鞘炎，吸收障碍综合症和慢性呼吸道疾病。感染鸡出现免疫抑制而引起继发性感染，死亡率升高等等，造成比较大的经济损失。近年来研究者对ARV，进行了不同的检测诊断方法及不同类型疫苗的探索。 课题分别对ARV σ 3基因构建的真核表达载体(pcDNA-σ 3)、构建的重组载体pcDNA-σ 3的免疫效果、ARV非结构蛋白σ NS的克隆表达及序列分析进行了研究。 采用RT-PCR技术扩增禽呼肠孤病毒ARV S1133株的σ 3基因，将σ 3基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)载体上，获得重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定，表明插入的片段为σ 3目的基因，插入的位置、大小和阅码框架均正确，成功构建了真核表达载体重组质粒pcDNA-σ 3。 分别制备pcDNA-σ 3 DNA疫苗、ARV灭活苗及σ 3蛋白苗，将制备的疫苗分别免疫SPF鸡(各10羽)2次后，用ARV S1133株对DNA疫苗免疫组、灭活苗免疫组、σ 3蛋白免疫组及对照组进行攻毒。攻毒4天后采集鸡的内脏组织器官经处理后使用RT-PCR方法进行检测。RT-PCR的检测结果为DNA疫苗免疫组(10％)检出率与对照组(30.9％)差异显著(p＜0.05)，与灭活苗免疫组(7.4％)及σ 3蛋白免疫组(3.7％)差异不显著(p＞0.05)。说明用构建的pcDNA-σ 3免疫SPF鸡，鸡只获得了较好的免疫保护。 研究还采用RT-PCR技术，扩增10株禽呼肠孤病毒σ NS非结构蛋白基因，