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目的：将COX-2抑制剂与抗癫痫药物的联合用于难治性癫痫治疗,观察难治性癫痫的发作的情况,探讨抗癫痫药联合COX-2抑制剂治疗难治性癫痫的机制,为临床治疗难治性癫痫提供一种新思路。方法：1、实验分组:本实验设立5个实验组,分别为假手术组,难治性癫痫模型生理盐水治疗组(生理盐水组)、难治性癫痫模型卡马西平治疗组(卡马西平治疗组)、难治性癫痫模型卡马西平联合塞来昔布治疗组(联合治疗组)、难治性癫痫模型塞来昔布治疗组(塞来昔布治疗组)。2、动物模型的建立:a、模型组:采用海人酸海马快速点燃方法建立癫痫大鼠模型,即将海人酸(Kainic Acid,KA)1.5ug(1ug/ul)定点注入wistar大鼠右侧海马CA3区位置,注射区和额窦安装电极,缝合后观察。按照 Racines分级进行行为观察同时进行脑电图检测,若大鼠在0.5-6小时内出现3-5级痫性发作且脑电图都异常,表明癫痫模型造模成功。b、假手术组:将等量的生理盐水注入大鼠右侧海马CA区注射,注射区和额窦安装电极,缝合后观察3、难治性癫痫模型的建立:卡马西平灌胃每日两次,用量为125mg/kg,连续28天,然后观察对大鼠的是否有痫样发作并测一次脑电图。4、筛选标准:a、脑电图,正常的大鼠脑电图表现为5-12 Hz的α波或17-19Hz的β波,波幅20-80μV,即基础波,表现为有高幅尖波等异于基础波的脑电波可作为诊断癫痫发作的依据;b、按照Racines分级观察:0级:正常;1级:面肌痉挛,如动须、节律性咀嚼等;2级:节律性点头;3级:前肢痉挛;4级:站立并前肢痉挛或强直;5级:持续站立或不能站立并跌倒,上下肢抽搐。发作达到1级及以上为异常。c、脑电图结果和行为观察结果都异常表明难治性癫痫模型造模成功。5、药物治疗:5组实验组分别给予相应组的药物治疗28天。6、检测指标:观察大鼠癫痫发作情况、脑电图,p糖蛋白及COX-2免疫组化检测实验结果。结果：1、联合治疗的疗效:治疗28天后,大鼠癫痫发作程度及脑电图结果表明联合卡马西平和塞来昔布治疗难治性癫痫模型比卡马西平单独治疗(p=0.044,p<0.05)和塞来昔布单独治疗(p=0.012,p<0.05)疗效好。2、单药物治疗效果:塞来昔布治疗组、卡马西平治疗组和生理盐水治疗组三组间的疗效无差别(p=0.50,p>0.05),表明卡马西平或塞来昔布单独治疗难治性癫痫无效果。3、、塞来昔布对难治性癫痫模型大鼠脑组织中COX-2和p糖蛋白的影响:通过免疫组化检测发现联合治疗组中大鼠大脑中p糖蛋白及COX-2的含量比生理盐水组4、大鼠脑组织中COX-2与p糖蛋白的相关性:治疗28天后,通过光密度分析大鼠脑组织中p糖蛋白与COX-2的含量,结果显示:大鼠脑组织中COX-2与p糖蛋白呈直线正相关关系(r=0.777),提示在本实验中p糖蛋白的表达与cox-2有关。5、COX-2表达高低对治疗效果的影响:将卡马西平治疗组与联合治疗组的难治性癫痫模型大鼠中, COX-2低表达模型大鼠的药物治疗效果比高表达模型大鼠治疗效果好(p=0.025,p<0.05)。6、p糖蛋白表达高低对治疗效果的影响:在卡马西平治疗组与联合治疗组的难治性癫痫模型大鼠中, p糖蛋白低表达模型大鼠的药物治疗效果比高表达模型大鼠治疗效果好(p=0.028, p<0.05)。结论：cox-2抑制剂塞来昔布联合抗癫痫药物卡马西平治疗难治性癫痫模型大鼠能使大鼠发作明显减少,同时COX-2及p糖蛋白表达减少,表明难治性癫痫的控制与COX-2及p糖蛋白的表达减少相关。推测塞来昔布联合卡马西平治疗难治性癫痫的机制可能是通过COX-2抑制剂抑制COX-2表达,导致p糖蛋白表达减少,从而使卡马西平在脑组织中浓度上升,最终减少难治性癫痫的发作。