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目的探讨核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在梗阻性黄疸肝损伤中的作用及维拉帕米对其表达的影响。方法(1)将雄性SD大鼠48只随机分成胆总管结扎组(BDL组)、胆总管结扎+维拉帕米组(BDL+V组)、假手术组(Sham组),每组16只。(2)氯胺酮腹腔注射麻醉后经腹游离胆总管并结扎、切断,制作梗阻性黄疸大鼠模型。Sham组仅开腹后游离胆总管,不结扎切断胆总管。(3) BDL+V组术后第一天起,每天腹腔注射维拉帕米2 mg/kg,直至处死。Sham组和BDL组则同期腹腔注射等量生理盐水。(4)分别于术后第7天、14天处死大鼠。取肝组织行HE染色常规病理,TUNEL法观察肝细胞凋亡,采用免疫组化法及蛋白质印迹法检测肝组织NF-κB p65蛋白表达以及丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。经下腔静脉取血测定血清总胆红素(TB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)。结果(1)肝脏病理形态学观察:胆总管结扎术后第7天、14天取标本见肝脏肿大呈黄褐色,胆总管近端明显扩张,且张力很高;假手术对照组无上述改变。光镜下肝脏病理改变:BDL组大鼠可见小胆管增生,汇管区炎性细胞浸润,14天标本见大量小胆管增生,部分区域肝细胞出现变性、坏死;相同时间点BDL+V组大鼠肝细胞变性坏死较BDL组轻;Sham组大鼠无明显变化。(2)肝组织NF-κB p65表达:BDL+V组NF-κB p65的表达在7天和14天均明显低于BDL组(P＜0.01);Sham组大鼠肝组织仅有微弱表达。(3)肝细胞凋亡情况:BDL组及BDL+V组均见大量细胞凋亡;但在BDL+V组凋亡细胞数低于BDL组(P＜0.01～P＜0.05);Sham组肝细胞仅见少量凋亡。(4)肝组织MDA和SOD含量的变化:BDL组及BDL+V组大鼠血清MDA含量均明显高于Sham组而SOD明显低于Sham组;但在BDL+V组MDA含量低于BDL组(P＜0.01～P＜0.05)而SOD高于BDL组(P＜0.05)。(5)血清TNF-α和IL-6的变化:BDL组及BDL+V组大鼠血清TNF-α、IL-6均明显高于Sham组(P＜0.01);但BDL+V组大鼠血清TNF-α和IL-6(P＜0.01～P＜0.05)均低于BDL组。结论(1) NF-κB的活化上调了梗阻性黄疸时炎症因子的表达,对NF-κB活性的调控可能是改善梗阻性黄疸时肝脏等器官功能损害的有效治疗靶点。(2)应用钙离子阻滞剂维拉帕米可抑制肝脏NF-κB的表达,减少肝细胞凋亡,并降低血清TNF-α和IL-6水平。(3)维拉帕米可能通过减少氧自由基的生成及抑制ⅠκB的降解,从而减少NF-κB的活化转位。