伪狂犬病毒属疱疹病毒科,可感染家畜和野生动物,猪是主要的宿主和传染源,仔猪一旦被感染,死亡率可达100%。目前尚无特效治疗药,多为疫苗防控。但由于病毒变异导致毒力增强和动物个体天然免疫力低下,常造成接种失败。已有研究发现,在接种疫苗时,配合适当的免疫增强剂,可提高接种成功率。实验室前期研究表明,白藜芦醇（Resveratrol,Res）具有免疫调节作用。本研究选择小鼠为试验动物,拟通过检测受免小鼠的脏器系数、免疫组织切片、血清T淋巴细胞亚群、脾淋巴细胞增值率、免疫相关抗体和细胞因子,体内评价白藜芦醇对伪狂犬疫苗免疫效果的影响;在此基础上,提取了受免小鼠腹腔巨噬细胞并采集其脾脏,体外评价白藜芦醇对巨噬细胞功能的影响和对脾脏TLR4/NF-κBp65/JNK信号通路的影响。主要研究结果如下:1白藜芦醇对小鼠接种伪狂犬疫苗免疫应答能力的影响体内评价Res对小鼠接种伪狂犬疫苗免疫应答能力的影响。方法:雌性BALB/c小鼠60只,随机分为6个组,依次为空白对照组,疫苗组,黄芪多糖（APS）组和白藜芦醇高、中、低剂量组。药物组连续4d灌胃Res和APS,空白对照组和疫苗组灌胃等量生理盐水。灌胃结束后24h皮下注射0.2m L伪狂犬疫苗,第14d时按上述方法重复给药一次,第25d采样。结果:与疫苗组相比,Res增加了受免小鼠脾脏的朗格汉斯细胞和胸腺的胸腺小体数目,显著提高CD8+T细胞值、脾脏T淋巴细胞增值率、血清IgG和IgG2a的抗体水平及小鼠脾脏和血清中免疫细胞因子的水平。与APS组相比,中剂量Res增加了受免小鼠脾脏的朗格汉斯细胞和胸腺的胸腺小体数目,显著提高小鼠血清IgG和IgG2a的抗体水平、脾脏IL-2的mRNA水平和血清IL-10的水平。结论:中剂量Res能有效增强伪狂犬疫苗的免疫效力,提高受免小鼠的免疫应答能力,其效果优于黄芪多糖。2白藜芦醇对受免小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响提取受免小鼠的腹腔巨噬细胞,体外评价Res对巨噬细胞吞噬杀伤功能和抗原递呈能力的影响,在细胞水平上探讨Res增强伪狂犬疫苗免疫效力的机制。方法:采用鸡红细胞吞噬试验检测巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,ELISA测定其分泌的溶酶体酶含量,最后采用荧光定量PCR和流式细胞术分析巨噬细胞CD80、CD86和MHC-Ⅱ的水平。结果:与疫苗组相比,Res显著提高了受免小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率、吞噬指数和其分泌的溶菌酶水平,上调CD80、CD86的mRNA水平和CD86、MHC-Ⅱ的表达。与APS组相比,中剂量Res明显增强了巨噬细胞的吞噬百分率,并上调了CD86和MHC-Ⅱ的表达。结论:Res通过提高巨噬细胞的吞噬杀伤能力和抗原递呈功能增强伪狂犬疫苗的免疫效力,其效果优于黄芪多糖。3白藜芦醇对受免小鼠脾脏TLR4/NF-κBp65/JNK信号通路的影响前面研究发现,Res组小鼠的脾脏分泌的细胞因子显著增加。有研究表明,细胞因子的分泌会受到信号通路调控。因此,本研究拟从信号通路方向研究Res增强疫苗免疫效力的机制。方法:采用蛋白质印迹法检测受免小鼠脾脏组织中TLR4/NF-κBp65/JNK通路上关键蛋白的表达。结果:与疫苗组相比,Res明显上调了TLR4、IKK、NF-κBp65、JNK和p-JNK蛋白的表达,并下调IκBα蛋白的表达。与APS组相比,中剂量Res显著上调TLR4、NF-κBp65、JNK和p-JNK蛋白的表达,并下调IκBα蛋白的表达。结论:Res通过激活受免小鼠脾脏TLR4/NF-κBp65/JNK信号通路,调控免疫细胞因子的分泌,增强伪狂犬疫苗的免疫效力,其效果优于黄芪多糖。综上所述,白藜芦醇通过增强受免小鼠免疫器官的功能、提高CD8+细胞数量、脾脏T淋巴细胞率和与免疫相关的抗体和细胞因子的表达,增强伪狂犬疫苗的免疫效力。其作用机制为增强受免小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬杀伤和抗原递呈功能及激活脾脏TLR4/NF-κBp65/JNK信号通路。