目的： 模拟临床上不合理使用抗生素过程,在体外诱导阴沟肠菌耐药,构建稳定传代的阴沟肠杆菌产ESBLs的高耐药株模型。通过对阴沟肠杆菌敏感株、临床耐药株和诱导耐药株对常用抗菌药物敏感试验结果的异同进行分析,探讨阴沟肠杆菌的耐药机制,为临床合理应用抗生素提供依据。同时,比较临床分离耐药株和诱导耐药株PER-1型和CTX-M-18型ESBLs的异同,探讨临床不合理用药对两种不同基因型ESBLs的影响。 方法： 利用梯度浓度法,取临床分离对头孢他啶敏感的阴沟肠杆菌10株,应用不同梯度浓度头孢他啶逐级诱导敏感株成为诱导耐药株,采用Kirby-Bauer纸片扩散法对10株诱导后耐药菌株、10株临床分离对头孢他啶敏感菌株、及10株临床分离耐药株进行药物敏感试验；应用改良的双纸片法(MDDT)筛选ESBLs表型；采用PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳对临床耐药株和诱导耐药株检测PER-1型和CTX-M-18型超广谱β-内酰胺酶。 结果： 1.阴沟肠杆菌临床分离株大部分对头孢菌素类抗生素敏感,除外头孢呋辛(敏感率为20％),对阿莫西林/克拉维酸的敏感率为10％,而对哌拉西林的敏感率有60％,氨曲南敏感性为100％。 2.经头孢他啶诱导后稳定传代的阴沟肠杆菌高耐药株,对大部分头孢菌素、青霉素类抗生素及氨曲南耐药,只对头孢吡肟仍保持敏感率达90％。此外,对亚胺培南,阿米卡星,复方新诺明,环丙沙星仍保持诱导前的敏感性。 3.临床耐药株更呈现多重耐药,不仅仅对β-内酰胺酶类抗生素耐药,而表现为对阿米卡星耐药率30％,中介率30％,复方新诺明耐药率60％,中介率10％,环丙沙星耐药率40％,中介率10％,亚胺培南的敏感率仍达100％。 4.MDDT表型筛选法结果：临床耐药株有8株菌有协同作用,MDDT筛选试验为阳性,而诱导耐药株则没有显示协同作用。 5.临床耐药株和诱导耐药株PER-1型ESBLs电泳结果：没有出现653BP的目的条带。临床耐药株和诱导耐药株CTX-M-18型ESBLs电泳结果：临床耐药株有4株出现866BP目的条带；诱导耐药株有5株出现866BP目的条带。 结论： 长时间、不规范应用低于正常杀菌剂量的抗生素容易诱导出细菌的耐药性,临床抗感染治疗合理选择抗生素和足量地应用抗菌药物非常必要。头孢他啶可以诱导CTX-M-18型ESBLs产生,不能诱导PER-1型ESBLs出现。