【摘 要】
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磁性纳米球以其特殊的超顺磁性和超微粒子性广泛应用于生物、医学、食品安全等众多领域中。为了进一步提高磁性纳米球应用于免疫检测技术的检测效率、灵敏度和可靠性,本研究
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磁性纳米球以其特殊的超顺磁性和超微粒子性广泛应用于生物、医学、食品安全等众多领域中。为了进一步提高磁性纳米球应用于免疫检测技术的检测效率、灵敏度和可靠性,本研究采用在磁性纳米球表面修饰抗蛋白非特异性吸附(nonfouling)材料,使接枝抗体的纳米免疫磁球在检测过程中减少蛋白质非特异性吸附的干扰,提高检测灵敏度,降低检测误差。本研究首先合成了引发剂和抗蛋白非特异性吸附材料单体-羧酸甜菜碱丙烯酰胺(CBAA),通过表面引发原子转移自由基聚合法(Surface-Initiated Atom Transfer Radical Polymerization, SI-ATRP)在磁性纳米球表面形成polyCBAA的聚合物刷,经酶联免疫吸附测定法(ELISA)表征抗蛋白非特异性吸附能力,再通过CBAA上的羧基功能基团接枝抗β-hCG抗体,考察在PBS和50%牛血清中检测hCG能力。通过上述的实验研究,得到以下结论。(1)经pCBAA修饰的磁性纳米球具有了相当优异的抗蛋白非特异吸附能力,非特异性蛋白吸附约为未经修饰的磁性纳米球的5%,降低了95%以上。(2)磁性纳米球的抗蛋白非特异性吸附能力与pCBAA的厚度有关,通过改变反应条件,控制膜厚,得到在22.2+3.2nm的厚度下抗蛋白吸附达到了较理想的值,为未经修饰的纳米球的4.53+0.9%。(3)经pCBAA修饰后的磁性纳米球接枝抗体应用于免疫检测时,较未修饰pCBAA的纳米免疫磁球具有更好的检测线性和更低的检测误差,并且在PBS和50%牛血清中的检测结果几乎一致,而未修饰的纳米免疫磁球在这两种环境中的检测结果存在较大差别。(4) pCBAA修饰的纳米免疫磁球在50%牛血清中能够在低浓度样品下保持很好的检测线性,很高的检测灵敏度。能够获得比传统酶联免疫测定方法的检测极限低1个数量级。
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