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目的:本实验通过提取外周血中单核细胞,探究对照组及稳定型心绞痛患者外周血中单核细胞内丙酮酸脱氢酶复合体的活性与表达以及丙酮酸脱氢酶激酶的表达水平。
方法:收集2019.02-2019.11于大连医科大学附属第二医院心内科住院的患者,根据入选标准和排除标准,收集体检健康者30例,作为对照组(Control),收集性别、年龄等与对照组相近的稳定型心绞痛(stable angina SA)30例。入选对象均由我院心内科医生进行病史的详细询问,主要内容包括:年龄、性别、身高、体重、吸烟史、高血压病史、家族遗传史等。入选对象均于入院第二日早晨由我院心内科护士空腹采集肘中静脉血,测定血常规、心肌标志物等生化指标外,额外留取3个经EDTA抗凝血液样本,约10ml。将样本中的单核细胞分离,通过流式细胞术测定其纯度,选取符合实验标准的单核细胞,通过NADH还原法,检测单核细胞内丙酮酸脱氢酶复合体(pyruvate dehydrogenae complex,PDC)的活性,并提取单核细胞内蛋白,通过Western Blot方法检测单核细胞中PDC各亚基及丙酮酸脱氢酶激酶(Pyruvate dehydrogenase kinase,PDK)各同工酶的表达水平,应用SPSS22软件进行统计和数据分析。
结果:1.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC活性升高,差异具有统计学意义(p<0.001);
2.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC E1α亚基呈高表达,差异具有统计学意义(p<0.01);
3.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC E2亚基呈高表达,差异具有统计学意义(p<0.01);
4.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDK1呈高表达,差异具有统计学意义(p<0.001);PDK2和PDK4表达差异无明显统计学意义;
结论:1.稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC活性升高,提示PDC活性增加可能参与动脉粥样硬化的发生发展;
2.稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDK1表达升高,提示PDK1表达增加可能参与减缓动脉粥样硬化的发展。
方法:收集2019.02-2019.11于大连医科大学附属第二医院心内科住院的患者,根据入选标准和排除标准,收集体检健康者30例,作为对照组(Control),收集性别、年龄等与对照组相近的稳定型心绞痛(stable angina SA)30例。入选对象均由我院心内科医生进行病史的详细询问,主要内容包括:年龄、性别、身高、体重、吸烟史、高血压病史、家族遗传史等。入选对象均于入院第二日早晨由我院心内科护士空腹采集肘中静脉血,测定血常规、心肌标志物等生化指标外,额外留取3个经EDTA抗凝血液样本,约10ml。将样本中的单核细胞分离,通过流式细胞术测定其纯度,选取符合实验标准的单核细胞,通过NADH还原法,检测单核细胞内丙酮酸脱氢酶复合体(pyruvate dehydrogenae complex,PDC)的活性,并提取单核细胞内蛋白,通过Western Blot方法检测单核细胞中PDC各亚基及丙酮酸脱氢酶激酶(Pyruvate dehydrogenase kinase,PDK)各同工酶的表达水平,应用SPSS22软件进行统计和数据分析。
结果:1.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC活性升高,差异具有统计学意义(p<0.001);
2.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC E1α亚基呈高表达,差异具有统计学意义(p<0.01);
3.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC E2亚基呈高表达,差异具有统计学意义(p<0.01);
4.与对照组相比,稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDK1呈高表达,差异具有统计学意义(p<0.001);PDK2和PDK4表达差异无明显统计学意义;
结论:1.稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDC活性升高,提示PDC活性增加可能参与动脉粥样硬化的发生发展;
2.稳定型心绞痛组患者外周血单核细胞内PDK1表达升高,提示PDK1表达增加可能参与减缓动脉粥样硬化的发展。