吉林省四种马铃薯再生体系和‘春薯3号’遗传转化条件的初探

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:nkxrb
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本研究以吉林省主栽品种‘大西洋’、‘春薯3号’、‘春薯5号’、‘吉薯1号’马铃薯脱毒试管苗为试验材料,主要开展以下两方面研究工作。一是分别对四种马铃薯茎段再生体系进行研究,并从植物激素选择和使用浓度入手优化马铃薯再生条件,以期建立马铃薯高效再生体系;二是利用获得的再生体系将gus基因转入‘春薯3号’马铃薯中,获得‘春薯3号’马铃薯转基因植株。试验最终建立了四种马铃薯的高效再生体系,并对‘春薯3号’外源基因遗传转化影响因素中的菌液浓度、侵染时间、共培养时间进行了优化。主要研究结果如下:1)确定了‘大西洋’适合愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;适合愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L KT+2.0 mg/L ZT,分化率达95%。2)确定了‘春薯3号’愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L KT+2.0 mg/L ZT,分化率达79.4%。3)确定了‘春薯5号’愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+3.0mg/L ZT+0.5 mg/L GA3,分化率达68.75%。4)确定了‘吉薯1号’愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+3.0mg/L ZT+0.5 mg/L GA3,分化率达85.7%。5)通过对农杆菌菌液浓度的分析、侵染时间的筛选、共培养时间的比较,确定了适合春薯3号的侵染条件:OD600≈0.5,侵染时间为10min,共培养时间为3d。6)试验成功获得了‘春薯3号’抗性植株,通过PCR检测和gus染色证明外源基因已成功转入植物细胞中。通过上述研究,进一步了解了马铃薯种质基因型与其再生条件的关系,建立一套高效马铃薯植物再生体系,为吉林省地方马铃薯的栽培、种质资源保存和遗传育种提供了重要的参考。
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