随着人们生活水平的提高及生活方式的改变,心脑血管疾病已成为现代慢性疾病的典型代表,其中高血脂症是主要慢性病之一。高血脂症的发生、发展与自由基过量、脂质代谢紊乱、肠道菌群失调密切相关。天然产物提取物因其含有生物活性成分,通常具有多种药理作用,且安全、副作用少。本文以黑木耳、银耳、山楂为原料,采用液氮冷冻粉碎技术对原料进行预处理,再结合超声波辅助热水浸提法对黑木耳多糖、银耳多糖提取的工艺优化,超声波辅助乙醇浸提法对山楂黄酮提取的工艺优化,并对黑木耳多糖、银耳多糖中单糖组成进行分析;选取Wistar大鼠造其高血脂模型的同时处理以黑木耳多糖、银耳多糖、山楂黄酮及多糖黄酮复配物,研究多糖、黄酮提取物对大鼠脂代谢的影响;利用高通量测序的方法研究多糖黄酮复配物对大鼠肠道菌群的影响。通过分析,主要得到以下结论:(1)采用液氮冷冻粉碎方式的粉末颗粒大小均匀且较小,有利于多糖较好地溶出。通过粉碎过筛及激光粒度分布仪检测可知120目以上颗粒物常规粉碎仅占39.5%,而液氮冷冻粉碎占67.5%。(2)多糖、黄酮超声辅助提取。确定黑木耳多糖的最佳工艺参数为超声温度60℃,超声时间8 min,料液比为1:50,黑木耳粗多糖平均提取率为13.3%;确定银耳多糖的最佳提取工艺为:超声温度63℃,超声时间53.70 min,料液比1:73,银耳多糖最大提取率为18.92%;确定山楂黄酮的最佳提取工艺为:超声温度50℃,乙醇浓度70%,料液比1:40,山楂中黄酮的平均提取率为9.26%。(3)采用PMP柱前衍生-高效液相法对黑木耳多糖和银耳多糖的单糖组成进行分析。结果表明,黑木耳多糖的单糖组成及其比例如下:甘露糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:木糖:岩藻糖(8.64:1.00:13.47:1.69:2.13);银耳多糖的单糖组成及其比例如下:甘露糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖:木糖:岩藻糖(10.86:1.00:5.89:5.59:6.68)。(4)多糖、黄酮复配物辅助降血脂与抗氧化评价。黑木耳多糖、银耳多糖、山楂黄酮以及低、中、高剂量复配物对高血脂症大鼠血清TC、TG均有不同程度的降低作用。高剂量复配物组大鼠血清HDL-C含量(0.63±0.10 mmol/L)显著高于模型组(0.45±0.10 mmol/L)(P<0.05),中剂量复配物组LDL-C含量(0.33±0.07 mmol/L)和高剂量复配物组(0.31±0.03 mmol/L)显著低于模型组(0.42±0.08 mmol/L)(P<0.05),高剂量复配物组起到明显的降低患动脉硬化疾病的风险。低、中、高剂量复配物组大鼠血清、脑和肝脏组织中SOD和GSH-Px活力较模型组上升,MDA含量下降。(5)多糖、黄酮复配物对肝脏的保护作用。与模型组相比,低、中、高剂量复配组大鼠血清中的AST、ALT酶活力均显著下降(P<0.05),而银耳多糖组、山楂黄酮组大鼠的两项相应指标均未产生显著性差异(P>0.05),说明多糖、黄酮联合使用对肝脏有较好的保护作用;与模型组相比,高剂量复配物组肝脏系数显著性降低(P<0.05)。通过大鼠肝脏组织形态学分析可知,中、高剂量复配物组脂肪空泡明显减少,肝索细胞排列较整齐,有效改善肝脏组织状态。(6)多糖、黄酮复配物对肠道菌群的正向调节作用。高血脂模型组大鼠肠道菌群结构失调,其中大肠杆菌/志贺氏菌、螺杆菌、β-变形菌纲、伯克霍尔德氏菌目、梭菌属、粪球菌属等有害菌数量上调,双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌的相对丰度降低;高剂量复配物组大鼠可抑制肠道中大肠杆菌/志贺氏菌、梭菌属等有害菌的增殖,并能够较好的促进乳酸杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等有益菌的生长。综上所述,采用液氮冷冻粉碎联合超声波辅助提取技术可实现多糖、黄酮良好的提取效果,多糖与黄酮复配可达到良好的降血脂、抗氧化及对肝脏具有保护作用,且对肠道菌群具有良好的正向调节作用。本研究将为未来多糖、黄酮类功能性食品的开发奠定理论基础。