青花菜遗传转化体系的建立及其BO-ACO<,2>基因转化的研究

来源 :莱阳农学院 青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fishe1042
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以青花菜无菌苗为试材,以MS培养基为基本培养基进行了青花菜离体再生体系的建立以及形态建成过程中生理生化变化的分析。结果表明:在所选用的子叶、下胚轴、茎段、叶片(分带主脉和不带主脉)、叶柄外植体中,以下胚轴和茎段为再生的最适外植体,其芽分化率可达97%;其余所选外植体按芽分化率计依次为子叶、不带主叶脉的叶片切块、带主叶脉的叶片切块、叶柄;外植体取材植株的苗龄不同,其培养后的分化能力不同,萌发后10d的无菌苗和生根15d的试管苗分别为下胚轴和茎段的最佳取材时期;在研究所涉及的生长调节剂中以6-BA/IBA对芽分化最有效,但不同外植体对6-BA/IBA浓度和配比要求不同,下胚轴与茎段外植体以4.0/0.3mg/L为最适;在MS培养基中附加0.1mg/LNAA对试管苗生根时间和生根质量均有良好作用。对青花菜离体再生过程中生理生化变化分析表明,愈伤组织形成、不定芽分化均与其组织内部大分子变化有关。可溶性蛋白质含量在整个过程中呈增加趋势,SDS-PAGE电泳谱带显示伴随外植体组织细胞脱分化、愈伤组织增殖和芽分化有新的蛋白带出现;过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)活性也随形态发生呈相应的变化趋势。   在此基础上用含有正向BO-ACO2表达载体和反向BO-ACO2表达载体的根癌农杆菌进行了农杆菌介导的青花菜遗传转化体系的研究。结果表明:以子叶和下胚轴为外植体时,芽分化阶段Km的筛选浓度分别为20mg/L和30mg/L时,筛选效果较好;在芽苗生根阶段Km的筛选浓度以15mg/L为宜。抑菌抗生素以羧苄青霉素效果好,使用浓度为300mg/L。预培养提高了转化效果,最佳预培养时间为2d。对转化过程其他参数的研究表明:最佳侵染时间为5min;侵染菌液的最适浓度为OD600=0.2;最适共培养时间为72h;最适宜的维持培养时间为20d。获得了7个拥有外源BO-ACO2基因的整合和卡那霉素抗性基因整合及其表达的转化体,被测阳性转化体达100%。
其他文献
沪深股沪 市深 市2 0 0 2年 2 0 0 2年同比增幅 ( % ) 2 0 0 2年同比增幅 ( % )上市公司 (家 ) 1 2 2 3 71 5 1 0 .685 0 80上市股票 (只 ) 1 31 0 75 91 0 5 5 1 0 .1 8股
传统的森林资源管理主要是基于小班档案卡片和一些统计报表,其主要功能只是实现了对资源数据的查询和统计,缺少资源数据的空间分布和定位信息.随着森林资源开发利用与人类生
期刊
近年来,我国城市化发展进程不断加快,城市人口不断增多和面临的压力也日益增大。基于这种社会发展现状,如何更好、更充分的利用城市有限资源也来越受到人们的重视,也是相关人
本研究采用参与式农村调查与评价方法(PRA方法),对贵州省关岭县近年来社区造林项目中的人工造林情况进行了调查,并以龙潭村和岭岗村的调查为例,对影响人工造林质量的技术与非技
鸡西矿业集团公司张辰煤矿西三采区3
在小说《塔楼》中,伊根创新地以男性声音讲述故事,以开放的结局颠覆传统叙事,这不但赋予了哥特式小说新的活力,也形成了文本是要由作者掌控的独特风格.《塔楼》采用元小说叙
采矿业是一项基础产业,是国家重要能源产业,在国民经济与社会发展中具有重要的地位和作用。然而,矿山的开采也会引起矿区及其周围生态环境的污染。严重破坏生态平衡的基础产业工
本文主要探讨认知语言学与诗学之间的关系,并在“多样化的统一性”美学原则的基础上,考察了概念整合理论及其相关理论能为诗歌分析提供哪些有用的资源.通过对西蒙斯·希尼的
光肩星天牛Anoplophora glabripennis(Motschulsky),是我国分布广泛而且危害非常严重的蛀干害虫.1996年以来,美国相继在纽约、芝加哥和新泽西州等地发现光肩星天牛危害,由于