犬细小病毒病因其高传染性和高死亡率,成为危害犬最大的疫病之一。由于用于辅助治疗的各种化学药物会带来耐药性等一系列问题,使得研发新型高效、无毒无副作用的抗犬细小病毒病中药制剂成为新课题。苦参止痢胶囊是根据中兽医理论和卫气营血辨证施治的原则,选用苦参、白芍、木香等组成的中药复方胶囊制剂,具有清热燥湿,凉血止痢的功效。本文通过细胞试验、动物试验和临床用药来探讨苦参止痢胶囊对犬细小病毒病的治疗作用。试验一高效液相色谱法测定苦参止痢胶囊有效成分的含量采用反向高效液相色谱法测定苦参止痢胶囊中苦参碱、氧化苦参碱、芍药苷、去氢木香内酯和木香烃内酯的含量。采用Phenemonex C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,苦参碱和氧化苦参碱用10mmol/L的醋酸胺水溶液(用氨水调节pH8)-甲醇梯度洗脱的流动相,紫外检测波长为210nm,流速:1mL/min;芍药苷用乙腈-0.1%磷酸溶液(14:86)的流动相,紫外检测波长为230nm,流速:1mL/min;去氢木香内酯和木香烃内酯用甲醇-水(65:35)的流动相,紫外检测波长为225nm,流速:0.65mL/min。结果苦参止痢胶囊中苦参碱为2.2mg/g、氧化苦参碱为1.05mg/g、芍药苷为9.1ng/g和去氢木香内酯为13.5mg/g,木香烃内酯由于含量过低未测出。试验二苦参止痢胶囊在细胞上对犬细小病毒的作用研究为了观察苦参止痢胶囊体外对犬细小病毒的作用,以FK8]细胞为载体,通过间接免疫荧光试验(IFA),用荧光素标记进入细胞的犬细小病毒,在荧光倒置显微镜下观察,用ImageJ软件分析荧光。结果显示先加中药再感染病毒组和中药与病毒作用后感染组都能显著减少FK81细胞中犬细小病毒的表达量,先加中药再感染病毒组平均减少量为36%,中药与病毒作用后感染组平均减少量为46%;先感染病毒再加中药组FK81细胞中病毒表达量与阳性组无显著差异。表明苦参止痢胶囊溶液在细胞上能有效阻止犬细小病毒的吸附和侵入,对于在细胞内复制的犬细小病毒无明显抑制作用。试验三中西药治疗犬细小病毒病的临床试验为了观察苦参止痢胶囊对犬细小病毒病的治疗作用,用水平感染的7只病犬作为动物模型,分为中药组、西药组和阳性组,分别为3只、3只和1只,1只健康犬为空白,用苦参止痢胶囊和西药治疗,通过临床症状、病理解剖和组织病理学切片光镜及电镜观察。结果显示:苦参止痢胶囊和西药都能控制犬细小病毒病,其中苦参止痢胶囊组没有出现血痢的症状,组织病理学切片观察肠道组织也没有明显的出血,并且维持了肠绒毛结构的完整性,表明苦参止痢胶囊能抑制犬细小病毒引起的肠黏膜损伤和出血性病变,从而对犬细小病毒病达到治愈作用。试验四苦参止痢胶囊治疗犬细小病毒病的扩大临床试验为了进一步探讨苦参止痢胶囊防治犬细小病毒病的效果。方法:利用动物医院门诊收治的犬细小病毒病病例,采用纯西药治疗与中西药联合治疗的对比试验,统计两种药的治愈率、治愈疗程等情况。结果.:用纯西药治疗的32只犬细小病毒病病例的治愈率为75%;应用苦参止痢胶囊的中西药联合治疗的32只犬细小病毒病病例的治愈率为87.5%;且中西药联合治疗的平均治愈疗程为5.32d,低于纯西药治疗的平均治愈疗6.29d。中西药联合治疗组治愈犬平均止住血痢天数为3.86d,显著低于西药组的5.38d(P<0.05)。结论:苦参止痢胶囊对犬细小病毒病有良好辅助治疗作用。