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论述了包涵体粗提物蜂腔疫苗、工程菌全菌体蜂胶苗、工程菌全菌体灭活苗的构建及免疫原性实验，全文主要内容如下：
1．采用PCR技术，扩增出0.54kb的K99(F5)菌毛抗原基因，将其克隆到pUCm-T载体上，酶切鉴定成功构建重组质粒pUCm-K99；人工合成的、耐热肠毒素ST I基因片段和重组质粒,PUCm--K99，经酶切(BamH I+Sal I)、回收、连接，将ST I基因片段插入K99菌毛抗原基因的下游，经酶切和PCR方法鉴定，获得阳性重组质粒pUCm-K99-ST，经过测序分初证明完成K99-ST融合基因的构建。
2．重组质粒pUCm-K99-ST经EcoR I+Sa/I消化，获得K99-ST基因片段。将该片段分别插人表达载体．pGEX-4T-1及pET-30a中，筛选阳性重组质粒分别命名为pGEX-K99-ST和pET-K99-ST。将重组质粒pGEX-K99-ST和pET-K99-ST分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中，摸索最洼诱导条件(37℃，IPTG0.4mM/l，220r/min诱导4h)，SDS电泳分析，pGEX-K99-ST表达童相对较低，约为10％左右；而pET-K99-ST表达量较高约为25％以上；融合蛋白经回收、复性处理后，琼扩实验结果表明，K99-ST融合基因在工程菌BL21中获得表达，并具有与K99抗体结合的活性。
3．通过反向间接血凝技术，检测融合蛋白复性后的抗原滴度可以达到1：40。纯化融合蛋白后，使用弗氏佐剂对其进行包裹并免疫家兔(1d，14d，21d)，免疫剂量(抗原滴度是1：40为0.5mL/只，Western-blot证实融畲蛋白具有良好的免疫原性。根据专利ZL8910687 6配制相应疫苗(包涵体粗提物蜂腔疫苗、工程菌全菌体蜂胶苗、工程菌全菌体灭活苗)，使用小白鼠进行安全性试验和动物攻击试验，试验证实安全性良好，保护率较高。上述三种疫苗免疫家兔后采集抗血清，与处理后的强毒株上清温育时1-3日龄的乳鼠进行毒素中和试验，试验证实抗血清足以中和强毒株的STI肠毒素。