小檗碱对HL-60细胞增殖、凋亡及VEGFR2表达的影响

来源 :广东医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hejingyang0806
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]   本研究拟观察小檗碱(berberine)对体外培养的人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞的增殖、凋亡的影响,并初步探讨其与人血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growthfactor receptor-2,VEGFR2)表达的影响。   [方法]   体外培养HL-60细胞株,取对数生长期的细胞用于实验研究。倒置显微镜下观察小檗碱作用HL-60细胞后细胞形态的变化;采用CCK-8试剂盒检测不同浓度小檗碱作用HL-60细胞不同时间点的细胞生长抑制率;用流式细胞术检测HL-60细胞周期及细胞凋亡率的变化;Hoechst33258染色检测HL-60细胞凋亡情况;RT-PCR检测VEGFR2 mRNA的含量变化,Westernblot检测VEGFR2蛋白表达的变化。   [结果]   (1)细胞生长形态学观察:终浓度为6μg/ml、12μg/ml、24μg/ml、48μg/ml、96μg/ml小檗碱作用HL-60细胞12h、24h,细胞随着小檗碱浓度的增加,与对照组比较,细胞形态变化不明显;小檗碱作用细胞36h、48h,随着药物浓度的增加,镜下可见细胞胞体逐渐变小,部分细胞碎裂、可见较多细胞碎片。药物浓度越高,细胞密度越小,碎片越多。   (2)终浓度为6μg/ml、12μg/ml、24μg/ml、48μg/ml、96μg/ml小檗碱作用HL-60细胞12h、24h,随着小檗碱浓度的增加,细胞抑制率变化不明显;药物作用36h、48h,随着药物浓度的增加,抑制率逐渐增高。实验组与对照组相比较,差异具有统计学意义(F=15.236,P<0.01)。不同时间段组之间相互比较,差异亦具有统计学意义(F=4.618,P<0.05)。   (3)流式细胞术检测结果:终浓度为6μg/ml、12μg/ml、24μg/ml、48μg/ml、96μg/ml小檗碱作用HL-60细胞36h后,随着小檗碱浓度的增加,G1期细胞百分比增加,S期细胞百分比减少,实验组与对照组相比较,差异具有统计学意义(F=54.421,P<0.01)。同时,HL-60细胞的凋亡率随着小檗碱浓度的增加而增加,实验组与对照组相比较,差异具有统计学意义(F=1473.964,P<0.01)。   (4)终浓度为6μg/ml、12μg/ml、24μg/ml、48μg/ml、96μg/ml小檗碱作用HL-60细胞36h后,经Hoechst33258染色,观察到染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂,随着小檗碱浓度的增加,出现凋亡小体的细胞明显增多。而对照组细胞核染色均匀。   (5)RT-PCR、Westernblot检测VEGFR2 mRNA及蛋白的表达:终浓度为6μg/ml、12μg/ml、24μg/ml、48μg/ml、96μg/ml的小檗碱作用HL-60细胞36h后,细胞VEGFR2 mRNA及蛋白表达呈递减趋势,与对照组比较,差异具有统计学意义(F=8.699,P<0.01;F=4.408,P<0.01)。   [结论]   (1)小檗碱具有抑制HL-60细胞增殖、诱导其凋亡的作用。   (2)小檗碱能降低HL-60细胞的VEGFR2表达。
其他文献
长期以来,结核病都是对人类最主要的致命传染病之一。虽然近年来,结核病的死亡率有所降低,但是由于艾滋病的流行和结核分枝杆菌耐药性问题的日益严峻,结核病对人类健康的威胁仍然
目的:   通过尾静脉向心肌梗死大鼠移植骨髓间充质干细胞,探讨SCF和G-CSF对MSCs归巢到心肌梗死区的作用,并验证在梗死心肌组织中定向分化为心肌细胞的可能性及安全性,为干
莎车县地处地震高发区,由于近年周边地区不断发生破坏性较强的地震,老城区居民生命生命财产安全造成极大的威胁。为落实城市规划的要求,提高土地利用效率,改善民居居住环境,
风险因素存在于国际工程项目从商务谈判到建设施工的各个阶段。通过强化保险意识、提高保险管理水平,可以分散国际工程项目风险,将不确定的项目风险转变为固定的保费支出,从
目的:研究急性百草枯中毒大鼠肾损伤时炎症因子的动态变化及姜黄素的干预作用和机制。  方法:1.将清洁级SD大鼠(60只)随机的分成4组,正常对照组,姜黄素对照组,百草枯染毒组(2%质
目的:大肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,其发病率有逐年上升趋势。本研究通过检测单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、缺氧诱导因子-1α(hypox
期刊
构成艺术,是现代应用设计的基础。立体构成作为其重要的组成部分,被广泛应用于建筑设计、服装设计、家具设计、包装设计等领域。作为研究空间立体造型的学科,是进行立体设计
[目的]本研究旨在通过整体动物实验,对比分析A20的缺失对血管损伤后新生内膜形成的影响,探讨A20缺失对GlcN诱导的血管保护效应的影响。[方法](1)重组腺病毒的包装、扩增、有