副结核病是由禽分枝杆菌副结核亚种（Mycobacterium avium subsp）引起牛、羊、鹿、骆驼等以反刍动物为主多种动物共患的慢性传染性肠炎。本病广泛流行于世界各国,每年造成巨大经济损失。 本研究培养副结核分枝杆菌经过超声波粉碎处理,过葡聚糖G200层析柱和亲和层析柱提纯抗原。培养草分枝杆菌,经过超声波粉碎处理、离心取上清获得草分枝杆菌吸收抗原。饱和硫酸铵盐析法粗提鹿血清IgG,然后过葡聚糖G200凝胶层析柱和纤维素DEAE52柱精提IgG,免疫兔子制备兔抗鹿IgG抗体,然后用辣根过氧化物酶标记,制备兔抗鹿酶标抗体。 采用副结核亲和层析抗原,待检鹿血清以草分枝杆菌抗原吸收,建立用于检测鹿副结核病血清抗体的间接ELISA诊断方法。然后,对有代表性的鹿群进行副结核病抗体检测,获得相应的流行病学资料,从而为防制鹿副结核病提供一定的依据。结果如下: 间接ELISA程序:将亲和抗原以包被液（碳酸盐缓冲液）稀释成最适包被浓度40ug/ml,分别吸取100ul,包被反应板置37℃温育3h后,再于4℃冰箱过夜,同时各板设抗原、抗体和酶标抗体对照。次日甩去包被液,以含0.05%Tweed-20的0.01M pH7.4PBS（PBST）作为洗涤液,洗涤3次,每次3min（3×3min洗涤）。取血清100ul,分别加入草吸抗原100ul,PBS800ul,37℃感作1h,中间振摇数次。再取上清液100ul,加入900ul酶标抗体稀释液中,吸取该样品,每孔加入100ul,37℃作用1.5h,3×3min洗涤。将酶标抗体用0.1%BSA-PBST稀释成工作浓度1:4000,每孔加入100ul,37℃作用1.5h,3×3min洗涤。加入新配制的底物（OPD）溶液100ul,37℃湿盒避光作用20min。每孔加2M H₂SO₄一滴终止反应,以DG-3022A型酶联免疫检测仪测定OD值（波长490nm）,判定结果。 利用本研究建立的鹿副结核病间接ELISA诊断方法对九台、净月、农大和上海4个鹿场的760头份鹿血清进行检测,阳性61头份,阳性率为8%。