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菠萝是我国华南地区最具特色的水果,但黑心病严重,导致大量的采后损失。我国菠萝产区普遍在菠萝果实生长期喷施GA3促进果实膨大,在果实采收前喷施乙烯利使菠萝提前转黄,这两项措施加重了菠萝黑心病的发生。我们的前期研究表明,ABA处理可有效减轻GA4+7和乙烯利处理过的菠萝的黑心病,但其机理尚不明确。本文通过研究GA4+7或乙烯与ABA结合处理对GAs生物合成的影响,以及GAs生物合成抑制剂DPC和UCZ对菠萝黑心病的影响及其与内源GAs生物合成的关系,旨在揭示ABA和GA在调控菠萝黑心病方面的拮抗作用。同时,本论文还研究了温度对GA2ox基因启动子转录活性的影响,旨在揭示低温控制菠萝黑心病的机制。主要研究结果如下:1.外源ABA能有效控制黑心病的发生,外源GA(GA4+7)处理加重了黑心病,而GA和ABA结合处理黑心病显著低于GA处理,这反映了ABA对GA的拮抗作用。ABA处理后在贮藏后期下调了GA生物合成基因GA20ox和GA3ox基因的表达,GA和ABA结合处理从处理后1 d起GA生物合成基因GA20ox和GA3ox表达即低于GA处理,表明在采后菠萝中,ABA对GA的拮抗主要体现在下调内源GAs合成关键基因表达,进而抑制GA的生物合成。2.乙烯利(Eth)处理加重菠萝黑心病,而Eth和ABA结合处理能有效控制菠萝黑心病,表明ABA可逆转Eth加重黑心病的效应。与Eth处理相比,Eth和ABA结合处理的菠萝从处理后1 d起下调GA生物合成基因GA3ox表达,减少了内源GA1的生物合成。表明Eth和ABA结合处理逆转Eth加重菠萝黑心病的效应涉及到ABA对GA的拮抗作用。3.DPC和UCZ处理后未能有效控制菠萝黑心病的发生。DPC和UCZ处理后,GA1和GA4含量并未稳定低于GA处理,DPC和UCZ处理的菠萝GA生物合成基因GA20ox基因表达持续低于GA处理,DPC和UCZ处理未能持续下调GA生物合成基因GA3ox和持续上调GA代谢基因GA2ox基因的表达,在DPC和UCZ处理后1 d ABA含量高于GA处理,而且在其他时候与GA处理之间呈此消彼长的关系。这些结果表明,DPC和UCZ处理不能明显提高内源ABA含量,不能对内源GA产生足够的拮抗作用。这可能是其不能有效控制菠萝黑心病的重要原因。4.为了研究低温调控AcGA2ox基因表达的机制,分离了AcGA2ox启动子3个5`末端缺失片段S1、S2、S3,片段大小分别为1980 bp、1080 bp和418 bp,分别含有3个、2个、1个低温响应元件,将这三个片段分别正向替换pBI121上的35S启动子,成功的构建重组表达载体PS1、PS2和PS3,导入农杆菌,转化烟草叶片,驱动GUS进行瞬时表达,分别在低温(7?C)和常温(23?C)共培养48 h。结果表明,与常温相比,低温提高了PS1和PS2活性。在低温条件下,PS1的活性最强,PS3的活性最弱,说明AcGA2ox启动子活性随低温响应元件的增多而增强。这表明,低温控制菠萝黑心病的发生机理可能是通过激活AcGA2ox启动子来实现。综上所述,ABA对GA的拮抗在调控菠萝黑心病中起着重要作用。低温可能通过激活AcGA2ox启动子来控制菠萝黑心病的发生。