ATRA对胶质瘤细胞系中Nanog表达的影响

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目的研究全反式维甲酸(ATRA)对胶质瘤细胞系SHG-44、U87MG、U251中胚胎干细胞转录因子Nanog表达的影响及其意义。方法在本实验研究中首先将正常培养的所有细胞系全都分为对照组(A)和实验组(B),实验组细胞采用正常的培养基进行培养,对照组用含全反式维甲酸(ATRA)10umol/L的培养基进行诱导培养5天;然后对上述这些细胞采用免疫细胞化学(ICC)染色法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别从蛋白水平和信使RNA水平来检测转录因子Nanog在胶质瘤细胞系SHG-44、U87MG以及U251中的表达情况。结果免疫细胞化学(ICC)实验的结果显示:胚胎干细胞的核心转录因子Nanog蛋白在SHG-44、U87MG和U251三种胶质瘤细胞系中均有表达,并且其阳性表达率分别是(65.43±1.66)%、(64.81±4.10)%和(63.54±2.06)%,经过统计学分析软件SPSS17.0分析后发现,这种差异没有统计学意义(F=0.155,P=0.858),也就是说转录因子Nanog在此三种细胞系中的表达没有明显的差异;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的结果提示:表达于胚胎干细胞中的核心调控转录因子Nanog mRNA在此三种胶质瘤细胞系中表达的相对含量分别是0.6368±0.0399、0.6421±0.0637、0.6516±0.0444,经过统计学分析后发现,这种差异也没有统计学意义(F=0.427,P=0.662)。应用全反式维甲酸(ATRA)诱导培养这些胶质瘤细胞5天后再使用上述试验方法对转录因子Nanog进行检测,结果发现核心转录调控因子Nanog蛋白在三种细胞系中的阳性表达率分别是(36.48±3.72)%、(35.50±4.10)%和(35.23±3.09)%,其阳性表达率较应用ATRA作用前明显下降,经统计学处理分析后发现这种差异具有显著的统计学意义(tSHG-44=259.1、tU87=13.768、tU251=15.490,PSHG-44=0.000、PU87=0.000、PU251=0.000);并且转录因子Nanog的mRNA在此三种细胞系中的相对含量分别是0.4583±0.0791、0.3331±0.0540、0.2551±0.0793,这同应用ATRA作用前相比其相对含量也有明显降低,且这种差异同免疫细胞化学(ICC)的结果基本相一致,具有明显的统计学意义(tSHG-44=7.176、tU87=25.556、tU251=14.763,PSHG-44=0.002、PU87=0.000、PU251=0.000)。结论胚胎干细胞核心转录调控因子Nanog在胶质瘤细胞系SHG-44、U87MG和U251中均有较高表达,并且全反式维甲酸(ARTA)能够诱导转录因子Nanog在胶质瘤细胞系SHG-44、U87MG及U251细胞中的表达降低,并能够促进胶质瘤细胞系细胞的分化,使其恶性程度减低。
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