DNA荧光探针的制备及其性能研究

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DNA是一种重要的遗传物质,在基因组学,病毒学,分子生物学等方面都有至关重要的作用。目前对于DNA的测定方法有很多,如色谱法、分光光度法、荧光探针法、显微光度法、免疫分析法。但是由于荧光探针法具有灵敏度高、简单、方便、快速、安全等优点,所以该法是目前应用最广泛的一种方法。  共轭聚合物有着良好的荧光性能,在检测时有着“分子导线”的优点。所以共轭聚合物被广泛研究,现在很多应用共轭聚合物通过共振能量转移改善小分子荧光探针的性能,从而使小分子荧光探针有着更好的检测性能。  本文合成了三种DNA荧光探针和一种共轭聚合物。对他们进行了一系列的表征,并研究了他们与ctDNA相互作用后的光学性质。  本论文主要内容如下:  (1)设计合成了三种荧光探针化合物和一种咔唑类共轭聚合物。并且通过核磁、质谱、元素分析等一系列方法进行了表征。  (2)对三种化合物分别测试了在水、DMF、THF、丙酮、乙醇、乙腈等不同极性的溶剂中的紫外吸收光谱、单光子荧光光谱和测试了在 tris-HCl中不同pH之下的单光子荧光光谱。分析了不同极性溶剂对化合物的紫外吸收光谱、单光子荧光光谱和荧光量子产率的影响。测试了在Tris-HCl中pH值对单光子荧光光谱的影响,其中pH对化合物2的影响最为明显。  (3)测试了三种化合物和不同浓度的 ctDNA作用后的紫外吸收光谱、单光子吸收光谱的变化。讨论了化合物和ctDNA的作用方式。  (4)测试了掺杂不同体积的共轭聚合物,对三种化合物的紫外吸收光谱、单光子吸收光谱的变化,并找出与化合物发生最佳能量转移时所需的聚合物的量。在最佳聚合物加入量的情况下研究了三种化合物与ctDNA作用后的紫外吸收光谱及单光子荧光光谱的变化。
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