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目的:探讨大鼠闭合性脑损伤后GFAP、VEGF的表达规律,并以此推断脑损伤后经过的时间,进而为法医病理及法医临床损伤时间的推断提供理论依据。 方法:40只雄性大鼠随机分为1个对照组和7个实验组,其中实验组按照损伤后经过时间不同又分损伤后1h组、损伤后6h组、损伤后12h组、损伤后1d组、损伤后3d组、损伤后7d组、损伤后14d组。实验组参照打击损伤法和自由落体撞击法两种方法自制打击仪复制大鼠闭合性脑损伤模型。对照组不做任何处理。采用免疫组化SP法和ELISA法检测大鼠闭合性脑损伤后脑组织及血清中GFAP和VEGF的表达情况,并对实验数据进行统计学分析。 结果:1、免疫组化:各实验组中,GFAP主要在星形胶质细胞胞浆中表达,伤后1h开始明显增多,7d内表达进行性增高,到伤后14d时表达下降接近对照组水平,有统计学差异(P<0.05);VEGF主要在神经元胞浆中表达,伤后1d时明显增多,到伤后3d时达高峰,14d时表达减少,差异有统计学意义(P<0.05);并且二者有相关性(P<0.05)。2、ELISA:各实验组血清中的VEGF含量升高早于脑组织中的VEGF表达,伤后6h开始就明显增多,到伤后7d时含量最多,伤后14d时接近对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:1、经过mNSS评分、大体观察、HE染色观察说明动物模型制作成功。2、大鼠闭合性脑损伤后,GFAP与VEGF的表达均随时间变化而变化,呈现出时序性变化的特点,二者有望成为法医实践工作中用于推断损伤时间的生物学标记物。3、GFAP有较高的敏感性和特异性,在损伤后1h就开始明显升高,对颅脑损伤时间的推断有重要意义。4、损伤后VEGF在血清的表达早于脑组织的表达,在伤后6h时就开始增多,提示血清中的VEGF可能对于损伤更为敏感,可以用于早期颅脑损伤时间的推断。5、GFAP与VEGF的表达存在相关性,可能与CBI后血脑屏障的破坏、AS的活化有关。