外源性NGAL对脓毒症大鼠急性肾损伤的肾保护作用及机制

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目的:探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对大鼠脓毒症急性肾损伤有无保护作用及其相关机制。方法:通过盲肠结扎穿孔法制备经典脓毒症大鼠急性肾损伤模型(CLP),将30只SD雄性大鼠随机分为假手术组(A组)、CLP+生理盐水(B组)、CLP+NGAL (C组),每组10只。取造模前(0h)、造模后24h大鼠静脉血,用于检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;造模24h后处死所有大鼠,取右侧肾组织制作病理切片,采用苏木精-伊红(H-E)染色,观察肾脏形态学变化;免疫组织化学染色检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达;末端转移酶标记技术(TUNEL)染色观察肾组织内细胞凋亡的情况。取左侧肾组织制备组织匀浆,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脂质氧化产物丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果:组内比较,B、C组24h肌酐及尿素氮水平较Oh升高明显,P<0.05;组间比较,B、C组24h的肌酐及尿素氮水平较A组升高明显,P<0.05,C组肌酐及尿素氮升高水平明显低于B组,P<0.05。H-E染色观察下,B组肾损伤最明显,C组肾损伤情况较B组明显减轻。免疫组化结果显示A组Caspase-3和Bax蛋白阳性表达率分别为(0.43±0.25)%、(1.37±1.1)%,C组分别为(7.32±2.04)%、(22.26±2.20)%,均显著低于B组的(20.33±2.01)%、(49.2±8.55)%。TUNEL染色见A组肾脏组织偶见凋亡细胞,C组13.6±3.42个/高倍镜视野,显著低于B组的26.4±7.2个/高倍镜视野(P<0.05)。ELISA检测结果显示,A组及C组MDA含量明显低于B组(P<0.05),C组SOD含量明显高于B组(P<0.05)。结论:外源性NGAL可能通过抑制Caspase-3的激活,降低促凋亡蛋白Bax的水平,减少细胞凋亡,同时抑制脂质氧化,减轻组织损伤,起到保护肾脏的作用。图7幅,表7个,参考文献45篇。
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