兔血浆SSAO的分离纯化及其酶动力学研究

来源 :汕头大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sam2009009
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背景与目的:血浆中含有氨基脲敏感型胺氧化酶(semicarbazide-sensitive amine oxidase,SSAO)。本研究的目的是纯化兔血浆中的SSAO蛋白,并以甲胺为底物研究兔血浆中具有SSAO酶活性的蛋白组分的酶动力学参数。材料与方法:利用DEAE-琼脂糖FF凝胶柱层析分离兔血浆蛋白,测定各收集组分的SSAO酶活性;以甲胺为底物测定SSAO酶动力学参数。结果:从兔血浆蛋白中分离得到两个具有SSAO酶活性的蛋白组分A和B。以甲胺为底物,未处理的血浆SSAO的酶动力学参数Km=1.83±0.13 mmol/L, Vmax=0.12±0.003 nmol/min/mg。蛋白组分B的酶动力学参数Km值(2.05±0.43 mmol/L)小于蛋白组分A的Km值(3.14±0.63 mmol/L)。组分B的酶动力学参数Vmax值(1.46±0.10 nmol/min/mg)小于组分A的Vmax值(2.85±0.20 nmol/min/mg)。结论:兔血浆含有两种SSAO酶组分,均可以催化甲胺氧化脱氨生成甲醛;组分A、B动力学特征有所不同。
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